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携带抗白细胞介素-2受体α单抗靶向超声微泡和对比超声结合评价肾缺血-再灌注损伤.pdf
中国医学影像学杂志 ChineseJournalofMedicalImaging ·627． 超声医学 UltrasoundImaging
责法 _ 脱机分析。微泡破坏前存储图像的平均声强度(Video
Intensity,VI)可代表靶向微泡在组织中的总浓度，
1．1 实验材料 昆明小鼠10只，体质量为25～
包括黏附和循环微泡。微泡破坏后存储图像上的平
30g，雄性，南方医科大学实验动物中心提供，合格
均VI反应的是在血池中循环微泡的浓度。前者减去
证号：scxk(粤)2006—0015；二棕榈酰磷脂酰胆碱
后者得到的是黏附微泡在组织中的浓度。取图结束
(DPPC，美 国Sigma公司)、聚 乙二醇 (PEG，德
后，应用CEU图像分析软件 (美国Virginia大学)
国Applichem公司)、生物化脂质 (DSPE—PEG2000．
对图像进行分析，测量小鼠肾造影VI值，单位为灰
biotin，美国Avanti公司)、链亲和素 (Streptavidin，
阶强度 (U)；并用彩色编码技术制作肾显影的彩色
美国Sigma公司)、抗小鼠IL．2R0【单克隆抗体 (美
编码 图像，红色、橙色和 白色依次代表 肾显影的强
国RE)公司)、EnVision免疫组织化学显色系统 (丹
度由弱到强。
麦Dako公司)、Sequoia512超声心动 图仪 (德 国
1。6 肾病理学检查 CEU 图像采集后取出小鼠肾，
Siemens公司)。
以4％甲醛固定。常规脱水，石蜡包埋制片。切片
1．2 制备超声微泡 参照文献 [4]，以上述脂质材料
作苏木精 一伊红 (HE)染色和免疫免疫组织化学
为原料制备普通脂质微泡和生物素化脂质微泡。生
EnVision法染色 。
物素化微泡按一定 比例加入链亲和素后再分别加入
1．7 统计学分析 使用 SPSS13．0统计分析软件进
抗小 鼠IL一2R0【单抗和 同型对照抗体，制备出靶 向超
行统计学分析，组问比较采用二阶段交叉设计方差
声微泡 (MBIL．2Ra)和同型对照微泡 (MB)。
分析，组内比较采用配对 f检验。P0．05为差异
1_3 体外评价超声微泡 构建出MBIL．2Ra和MB
有统计学意义。
后，以库尔特计数仪测定微泡的浓度 (％)及平均
粒径 (“m)；采用绿色荧光标记的二抗与MBIL．2Ra
相结合，荧光显微镜下观察抗 IL．2Ra单抗与微泡连
2．1 超声微泡体外评价 库尔特计数仪测得MBII~
接情况。
2Rot浓度为 (O．68±0．32)％×10个 m／l，微泡平均粒
1．4 建立肾IRI模型 对所有小鼠采用戊巴比妥钠
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