冰冻切片免疫酶染色法诊断血吸虫病的研究.PDFVIP

维普资讯 畴南医学院学报1989~第8卷第2j9j ·83 · 冰冻切片免疫酶染色法诊断血吸虫病的研究 朱 家 具 (奇生立学教研室 ) 提要 用感染血吸虫鼠肝组织内虫卵冰冻切片作免疫酶染色试验，检测 150倒 粪检阳性的血吸虫病人藏l50名健康人的血清，阳性半为96．7 ，假阳性率为1．3‰； 检测137例其它6种蠕虫病惠者和50倒内科疾病惠者，交叉反应 率 寿0～3．3 。语 法的敏感性显著地高于用血吸虫成虫冰冻切片作免疫酶染 色试验及环卵沉淀试验， 而且方法简便，应用抗原经济，检测率高硬获得结果较快，是一种较 为理想的血吸 虫病血清学诊断方法。 关键词 日本血吸虫病，．诊断}免疫酶技术／。诊断应用} 日本血吸虫病／免疫学 80年代，血吸虫病免疫酶测定 技 术 进 7．2PBS充分洗涤后，按李 允鹤 等(。]的方 展迅速。Kamiya等()用经 甲醛固定、石蜡 法，制成 7 m的冰冻切片，用 作IEST的抗 包埋的感染血吸虫鼠肝切片，进行卵内沉淀 原。 物的间接免疫过氧化 物 酶 试 验，李 允 鹤 =，试验血清 等(’)用感染血吸虫鼠肝组织 内虫卵冰 冻 切 150例粪检阳性的血吸虫病人，150名非 片抗原作免疫酶染色试验诊断血吸虫病，均 疫区健康人、19．7倒经过治疗的血吸虫 病 人 有较高的敏感性和特异性。陈静卿等(。)曾用 血清，137例包括肺吸虫、姜片虫、华 枝 睾 日本血吸虫成虫冰冻切片免疫酶染色法检测 吸虫，钩虫、蛔虫、班 氏丝虫病人以及50倒 血吸虫病人抗体，也有较好的结果。为了进一 内科疾病患者的血清。 步确定TEFS—IEST(鼠肝组织内虫卵冰冻 三，试验方法 切片免疫 酶 染 色 试 验 )及AWFS—IEST 在TEFS~AWFS抗原片上先复盖 一 片 (血吸虫成虫冰冻切片免疫酶染色试验 )的 直径为0．8cm的滤纸，滴加试验血清50 ，置 诊断价值，本文对两法诊断血吸虫病的敏感 于湿盒，37℃孵育45分钟 后，用0．01M、pH 性、特异性，重现性、交叉反应及疗效考核 7．2PBS—Tween20洗涤 2次，再经蒸馏 水 价值进行 了研究，同时用 环 卵 沉 淀 试 验 洗潦 1次。然后，加辣根过氧化物酶标记的 (COPT)进行对 比。 羊抗人IgG 50pl，孵育30分钟，同上法洗涤 。 最后用底物 (联苯胺，瑞典产 )显色。辣根过 材料和方法 氧化物酶标记羊抗人IgG及底韧显色均 按 李 一 、 TEFS夏AWFS抗原制备 允鹤等的方法 ()。反应标 准： “+”呈 浅 取感染30条血吸虫后6周小鼠门静脉处 棕红色I “++”呈棕红色， “+++”呈 成虫及 7周小鼠左叶肝脏，经 用0．01M，pH 深棕红色， “一”无色或仅显淡黄色 维普资讯 ·8 ‘· 法对47侧线虫病人血清均为眦性。 结 果