Th17细胞和相关因子在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠发病中的动态表达和依达拉奉的保护作用.pdfVIP

中文摘要 Thl7细胞及相关因子在实验性自身免疫性脑脊髓炎 大鼠发病中的动态表达及依达拉奉的保护作用一 摘 要 变化，以及依达拉奉对EAE的保护作用，进一步确立依达拉奉对MS的 治疗作用。 方法： 大鼠制备EAE模型，应用依达拉奉注射液进行干预。空白对照组用生理 盐水／CFA免疫动物。依达拉奉组免疫方法与EAE组相同，于免疫当天起 模型组每天给予生理盐水lml／d大鼠腹腔内注射。观察药物对动物临床表 现的影响，参照通用的临床评分标准对大鼠进行神经功能评分。于免疫后 第lO天各组随机取材，记为发病前组，并于各组发病后第3天(高峰期) 和第7天(缓解期)分别随机取材，记为3天组和7天组。将各实验组大 鼠按不同时期处死后取脊髓腰膨大部位进行HE染色观察炎症细胞浸润情 况，同时进行免疫组织化学染色，观察RORrt阳性细胞的分布并计数， 进行比较。用实时荧光定量PCR测定各组各时期大鼠脊髓腰膨大 的动态表达情况。心脏取血用酶联免疫吸附法测定血清中几．17和IL．6 1 的浓度值并进行比较观察各个时期变化情况。采用SPSS3．0统计软件进 行统计分析，发病率用百分数表示，组间比较采用卡方检验，计量资料以 均数±标准差(i士S)表示，多组计量资料均数的比较应用ANOVA方差分 析，组间两两比较采用SNK法，P0．05差异有统计学意义。当方差不齐 (P0．1)时，用多个独立样本非参数检验。 结果： 1动物发病情况：依达拉奉组平均发病时间明显低于EAE组，具有统计 ： l 中文摘要 计学意义(尸如．05)；依达拉奉组发病率低于EAE组，具有统计学意义(尸 O．05)。 2组织病理学观察： 2．1HE染色 2．1．1发病前：EAE组和依达拉奉组脊髓组织灰质内已经出现少数单核细 胞和淋巴样细胞浸润，未发现血管袖套样改变。 2．1．2发病后第3天：EAE组出现明显白质疏松、大量的单核细胞和淋巴 样细胞浸润和较多的血管袖套样改变(主要位于脊髓白质和灰质交界)， 比依达拉奉组病理表现严重。 2．1．3发病后第7天：EAE组和依达拉奉组单核细胞和淋巴样细胞减少， 血管袖套样改变消失，依达拉奉组减少更明显。 2．2RORrt免疫组化染色 2．2．1发病前：显示EAE组、依达拉奉组和空白对照组均有阳性细胞存在， 但是EAE组阳性细胞平均秩次要明显高于其他两组俨0．05)。 2．2．2发病后第3天：EAE组白质空泡形成、疏松，阳性细胞数平均秩次 明显高于空白对照组和依达拉奉组，且具有统计学意义(氏O．05)。 2．2．3发病后第7天：EAE组白质空泡和疏松程度较前没有明显的变化， 依达拉奉组白质空泡化和疏松化比EAE组程度要轻，阳性细胞平均秩次 明显低于EAE组有统计学意义(尸o．05)。 2．2．4动态变化：空白对照组各时间点变化不大，没有统计学意义 p0．05)。EAE组发病第3天与发病前、发病第7天比较，白质空泡明显， 白质疏松显著，有较多的阳性细胞的表现。依达拉奉组动态变化与EAE 类似，但是各个时间点的表达均低于EAE组，有统计学意义俨o．05)。 IL．6)含量及动态变化 3外周血中Thl7细胞相关细胞因子(rE．17 3．1外周血中几．17的含量： 3．1．1发病前：EAE组外周血中m．17平均含量较空白对照组和依达拉奉 组高，具有统计学意义俨o．05)。 3．1．2发病后第3天：EAE组外周血中Ⅲ．17平均含量较空白对照组和依 达拉奉组高，具有统计学意义(P0．05)。依达拉奉组高于空白对照组，具 有统计学意义伊0．05)。 中文摘要 达拉奉组高，具有统计学意义瞅O．05)。 3．1．4动态变化：空白对照组各时间点之间的差距不大，没有统计学意义 组，具有统计学意义湫0．05)。依达拉奉组各时间点外周血中IL．17平均 含量表达3天组高于发病前和7天组，具有统计学意义(脚．05)。 3．2外周血中IL．6的含量： 3．2．1发病前：EAE组IL．6的含