高脂饮食对沙鼠的病理生理学影响.docVIP

　　高脂饮食对沙鼠的病理生理学影响 　　近年来，随着我国经济水平的快速发展和人民生活水平提高，我国居民粮谷类食物摄入量逐年减少，脂肪供能比明显增加，并有向西方国家膳食结构转化的趋势[1],由此带来一系列健康问题，如高脂血症、脂肪肝、心脑血管疾病等。因此，研究高脂饮食对机体的影响具有极其重要的意义。长爪沙鼠（以下简称沙鼠）亦称蒙古沙鼠或黑爪蒙古沙土鼠、黄耗子、砂耗子等，属哺乳纲，啮齿目，仓鼠科，沙鼠亚科，沙鼠属，其肝内类脂质含量高，能保持高血脂和高胆固醇水平，血清胆固醇含量极易受饲料胆固醇含量影响，且高胆固醇饮食可导致肝脏脂沉积，对研究高血脂、胆固醇吸收和食源性胆固醇代谢等很具价值。本次实验旨在研究高脂饮食对沙鼠的病理生理学影响，为脂质代谢紊乱相关疾病的造模提供新思路。 　　1 材料和方法 　　1. 1 实验动物 　　清洁级成年雄性 Z:ZCLA 长爪沙鼠 48 只，体重（50 plusmn;10）g,浙江省医学科学院实验动物中心提供，许可证：【SCXK（浙）2008 -0033】，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障动物实验设施中【SYXK（浙）2008 -0115】。 　　1. 2 主要试剂 　　胆固醇由上海思吉生物制品有限公司提供，3 号胆盐由杭州微生物试剂有限公司提供，蛋黄粉由浙江省长兴县艾格生物制品有限公司提供，血糖（Glu）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、尿酸（UA）、肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬酸氨基转移酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBil）、淀粉酶（AMS）等诊断试剂盒均由上海申能-德赛诊断技术有限公司提供；低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）诊断试剂盒由上海复星长征医学有限公司提供；苏木素和伊红染料为 Sigma 进口分装，Masson 染色试剂合由中国福州迈新生物技术有限公司提供。 　　1. 3 主要仪器设备 　　日立 7020 全自动生化分析仪，德国 BecrmanAllegra X-15R centrifuge 离 心 机，德 国 MicromSTR120 自动组织脱水机，德国 Microm HM335E 半自动石腊包埋机，德国 LeicaRM 2025 病理切片机，德国 Leica DMLB2 显微镜。 　　1. 4 高脂饲料配制 　　由 80. 5%的普通饲料、10% 的蛋黄粉、7% 的猪油胆、2%的胆固醇及 0. 5% 的 3 号胆盐组成。普通饲料和高脂饲料均经浙江省医学科学院实验动物中心加工生产。 　　1. 5 分组及处理 　　48 只沙鼠适应性饲养 1 周后，随机分为正常组及模型组，每组 24 只，每组又分 4 周、8 周及 16 周 3个时相点。正常组予普通饲料喂养，模型组予高脂饲料喂养，自由饮水，两组分别在第 4、8、16 周末 3个时相点各随机处理沙鼠 8 只。处理前晚起禁食不禁水 18 h,次日上午空腹麻醉下采血，分离血清待用；取部分肝组织立即进行冰冻切片，油红 O 染色；收集心、肺、肝、胰、肾、脾、小肠（近回盲部）等脏器标本，于 10% 中性甲醛溶液中固定，经脱水、透明、浸蜡、包埋制成组织蜡块待用。 　　1. 6 检测指标 　　动态观察两组沙鼠 3 个时相点体重，全自动生化仪检测 3 个时相点血清 Glu、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C、UA、Cr、BUN、TBil、TP、ALB、ALT、AST、AMS水平，冰冻切片肝组织油红 O 染色观察肝脏脂质沉积情况，各脏器石蜡组织切片后常规 HE 染色光学显微镜观察组织病理学变化，Mossan 染色观察肝组织纤维化程度。 　　1. 7 统计学方法 　　计量资料采用均数 plusmn; 标准差（xplusmn; s） 表示，以SPSS17. 0 统计软件进行分析，两组之间比较采用独立标本的 t 检验，当 P lt; 0. 05 时表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 高脂饮食对沙鼠体重的影响 　　高脂饮食喂养 4 周后，模型组沙鼠体重增加稍快于正常组，但差异无统计学意义（P gt; 0. 05），至 8周时较正常组明显增加（P lt;0. 05），而 16 周时正常组体重略有增加，而模型组基本维持与 8 周同一水平，见表 1. 　　2. 2 高脂饮食对沙鼠血糖及血脂的影响 　　模型组沙鼠血糖水平随高脂饲料喂养时间增加而降低，模型组 16 周时相点较 4 周、8 周时相点显著降低（P lt; 0. 05），模型组 16 周时也较正常组 16周时明显降低（P lt;0. 01）。 　　血脂方面，除模型组 4 周时 TG 水平与正常组差异无统计学意义外，模型组 8 周、16 周时的 TG 水平及 3 个时相点的 CHOL