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贵阳医学院 2009 级硕士研究生论文
材料与方法
1.1 实验建模要求,实验目的及依据,
1.1.1 实验模型要求:参照离体平滑肌实验建立实验动物模型[2,3]。建模原理为:
哺乳动物平滑肌具有肌组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。输尿管
平滑肌肉有其特点,即兴奋性较低,一般由进入肾盂内的尿液张力刺激位于肾窦
内的细胞节律性产生电冲动向下传导,将尿团由输尿管近端挤压进入输尿管远
端,进入膀胱。输尿管收缩迅速,具有紧张性、自动节律性,对输尿管内离子化
学电位和尿量容量刺激较敏感。将离体组织器官置入模拟体内环境的溶液 (如
Krebs-Ringer 缓冲液)中,可以在一定时间内保持其功能,了解输尿管平滑肌收
缩肌力,频率及幅度等数据,了解其生理特性。
1.1.2 实验 目的及依据:
通过离体输尿管平滑肌实验检测输尿管电凝损伤后机能改变及病理形态
改变,探讨输尿管直接电凝热损伤后发生并发症的原因及预防方法。
一期实验目的:一期实验旨在了解输尿管电凝损伤后与正常组对比其机
能改变,形态学变化情况。故设定为正常输尿管节段组,电凝损伤 1 秒组,电凝
损伤 3 秒组。通过双极电凝闭合双钳片,在 40w 功率下,时间继电器分别作用于
输尿管表面浆膜,以损伤点为中心,切除电凝损伤 1 秒组,电凝损伤 3 秒组输尿
管节段各 20 条,取正常输尿管节段 20 条,每条长度为 2cm。制备输尿管平滑肌
条,机能测定。
手术部位选定依据: 在预实验中,我们发现,输尿管下段其长度约为
5-6cm,切取输尿管下段的不同节段行输尿管机能测定,发现各个节段间输尿管
机能(收缩力及收缩频率)无明显差异。故在正式实验中,将 12 只实验动物的
24 条输尿管下段随机分为正常组,电凝损伤 1 秒钟,电凝损伤 3 秒组取标本。
在输尿管下段 5-6cm 处每 2cm 节段中点处电凝,再切取标本。
二期实验目的:旨在了解输尿管下段双极电凝损伤后可能发生的临床并发
症,严重程度,有无临床转归趋势。观察时间为两周,两周后处死动物以输尿管
手术部位为中点,切除输尿管损伤节段标本制备输尿管平滑肌条行机能测定及病
理形态学检查。
二期实验中随机选择实验动物动物单侧输尿管下段距离肾盂 8cm 处为手
术部位,双极电凝在 40w 功率下分别作用输尿管浆膜 1 秒(12 只),3 秒(只)。
饲喂动物流程及观察,采用实验动物手术后观察方法,麻醉恢复期注意保
温,保持安静。术后三日内称重,给予青霉素 (10 万 U/kg)皮下注射。观察动物
精神状态,饮食及饮水情况,术区引流管情况,记录引流情况,体重改变情况等。
手术并发症判定标准:输尿管损伤后最常出现的是输尿管尿瘘,本实验在
二期实验中输尿管损伤部位在腹膜外置入引流管引出,缝合手术部位壁层腹膜,
避免了引流腹水而造成假象。
输尿管尿瘘观察及标准设定:术后观察引流情况,引流量,以引流自行停
止时间点超过 24 小时为尿瘘停止时间。术后两周取标本时观察术后部位情况,
了解输尿管尿瘘恢复情况以加以印证。
输尿管梗阻判定:预实验中我们发现,兔输尿管外径约 1-2mm,均能通过
Fr3 硅胶管,二期实验中,判定损伤后节段以上输尿管是否扩张积水以输尿管外
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贵阳医学院 2009 级硕士研究生论文
径>2mm,且不能通过 Fr3 硅胶管为标准。
1.2 实验动物
1.2.1 实验动物选择依据
参照目前实施的 《实验动物、微生物学等级及监测》(GB14922.2—2001)
标准:1 级:普通级动物 conventional (CV) animal:不携带所规定的人兽共患
病病原和动物烈性传染病的病原,简称普通动物。2 级:清洁级动物 clean (CL)
animal:除普通级动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰
大的病原,简称清洁动物。3 级:无特殊病原体级动物 specific pathogen free
(SPF) animal:除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和
对科学实验干扰大的病原,简称 SPF 动物。4 级:无菌级动物 germ free (GF)
animal:无可检出的一切生命体,简称无菌动物。
本实验着重探讨兔输尿管电热损伤后病理学及机能学改变情况,可选择使
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