产苯乳酸的乳酸菌分离筛选及菌种鉴定 screening and identification of phenyllactic acid-producing lactic acid bacteria.pdfVIP

产苯乳酸的乳酸菌分离筛选及菌种鉴定” 李兴峰1，江 波1，潘蓓蕾2，沐万孟1，张涛1 1(江南大学食品科学与安全教育部重点实验室，江苏无锡，214036) 2(中国食品科学技术学会，北京，100833) 摘 要 通过对自然发酵泡菜中乳酸菌的分离，建立了一种准确、快速的苯乳酸产生菌的筛选方法。在112株筛 选菌株中，获得1株苯乳酸高产菌株sK007。研究了苯丙氨酸对苯乳酸合成的影响，即增加苯丙氨酸的浓度可以 提高苯乳酸产量，苯丙氨酸是苯乳酸合成的前体。高产菌株经16srDNA序列初步鉴定为工nc幻施cⅢ”ssp．，Gen— Bank接受号为DQ534529。系统发育分析表踌它与植物乳杆菌(￡口c￡okcizz“s声如挖掘搿m)亲缘关系最近。 关键词 苯乳酸，乳酸菌，菌株筛选，16SrDNA，苯丙氨酸 acid，PLA)，也称3一苯基乳此，从不同来源分离筛选能够产生苯乳酸的乳酸菌非 苯乳酸(phenyllactic 酸或p一苯乳酸，即2一羟基一3一苯基丙酸，是近年来发现 常重要。 的一种新型天然防腐剂。1998年，DieuleveuX[1]发现 文中从自然发酵的泡菜中分离、筛选产苯乳酸的 rDNA 乳酸菌，研究苯乳酸的生物合成并且利用16S 白地霉(＆o￡矗c，L“mf彻did“m)发酵的干酪对单核 序列对高产菌株进行初步鉴定。 细胞增生李斯特菌(“5抛r如mo规ocy￡ogP72es)有很强 的抑制作用，通过分离、鉴定，最终确定苯乳酸是其中 1 材料与方法 的主要抑菌物质。2003年，Lavermicocco[23研究了苯 乳酸对多种引起食品腐败的真菌的作用，发现其有宽 1．1试验材料 1．1．1样品采集 广的抑菌谱，如抑制黑曲霉(AspP，．g删“s行iger)、黄 泡菜样品购自无锡天润发超市。 曲霉(Ap已rg删淞．∥n铆甜s)、娄地青霉(R佗icⅢi“m 1．1。2培养基 rDg粥．加以i)等。与Nisin(乳链球菌素)相比，苯乳酸 抑菌谱宽，能抑制多种食源性致病菌、腐败菌，特别是 能抑制真菌污染；溶解性好，易于在食品体系中扩散； O．58，MnSO。·4H20O．25，吐温 稳定性高，具有宽广的pH范围和热稳定性，这些优 2，MgS04·7H20 点决定了它在食品工业具有广阔的应用前景[3~5]。 801mL。调pH至6．2～6．4。 苯乳酸可由多种微生物产生，如白地霉n]、丙酸 C0315，琼脂15，pH6．2～6．4。 菌[63和乳酸菌口]。由于乳酸菌具有GRAS(公认为安 全)资格，可广泛用于发酵食品的生产。2000年，La— 分离培基(g／L)：MRS培养基中添加质量分数 为3％的CaC03、2％的琼脂。 vermicocca[73从酸面团中分离到的植物乳杆菌 筛选培养基(g／L)：同MRS培养基。 (kc￡o沈c洲“s声zn咒￡口r“m)21B能产生苯乳酸，这 1．1．3 主要试剂 是关于乳酸菌产生苯乳酸的首次报道。随后，相继发 苯乳酸、苯丙氨酸，购