高效液相色谱-串联质谱法测定庆大霉素C组分含量及各组分响应因子.pdfVIP

122 中国抗生素杂志2014年2月第39卷第2期 文章编号：1001．8689(2014)02—0122—06 高效液相色谱．串联质谱法测定庆大霉素C组分含量及各组分响应因子 于敏 张双庆 李佐刚’李波 (中国食品药品检定研究院，国家药物安全评价监测中心，药物代谢动力学室，北京 100176) 摘要：目的 建立测定硫酸庆大霉素中4个C组分含量的高效液相色谱一串联质谱方法，并考察各组分对质谱检测器的响应因 子。方法 利用SynergiPolar-RPC．。色谱柱(50mm×2．0ram，4gm，8oA)，以妥布霉素为内标，以流动相0．1％甲酸溶液一甲醇等度 洗脱(1o：90，V／，流速0．2mL／min，柱温35℃，分析时间5min。在 电喷雾离子化电离源上以选择反应监测方式进行正离子检 测，用于定量分析的离子反应分别为m／z478．2—322．2(C1)，464．2—322．2(C2+C2a)，450．2—322．2(C1a)，和m／z468．2—163．1(内 标1。结果 庆大霉素浓度的线性范围为0．5～500~tgL／，庆大霉素的定量下限为0．5ggL／。C1、C2+C2a、Cla4个组分的批 内和批问 RSD分别为0．2％～8．1％和3．6％～6．4％，批内和批间准确度分别为93．1％～107．1％~97．6％～104．9％。庆大霉素4个C组分各 自标准曲线 的斜率值无显著性差异，4／ffC组分在质谱检测器上具有相同的响应因子。结论 该方法特异性高、准确度好、精密度高，且4个 C组分对质谱的响应因子一致，可以利用高效液相色谱一串联质谱对庆大霉素制剂中各组分进行准确定量。 关键词：庆大霉素；妥布霉素；高效液相色谱一串联质谱法；响应因子 中图分类号：R917 文献标志码：A DeterminationofgentamicinCandresponsefactorbyhighperformanceliquid chromatography-tandem massspectrometry YuMin，ZhangShuang-qing，LiZuo—gangandLiBo (LaboratoryofDrugMetabolismandPharmacokinetics，NationalCenterforSafetyEvaluationofDrugs，NationalInstitutesofrFoodand DragControl，Beijing100176) Abstract 0bjective Toestablishaliquidchromatography．．tandemmassspectrometry(LC．．MS／MS)method forthequantificationofgentamicinCcomponents，andinvestigatetheresponsefactorsofthefourmajorgentamicin Ccomponentsdetectedbymassdetector．M ethods GentamicinCcomponentsandaninternalstandardtobromycin wereseparatedonaSynergiPolar—RPC。column(50mmx2．0mm，4x／m，8oA)usingisocraticmobilephaseof 0．1％ formicacidandmethanolataflOW rateof0．2mL／rain．Atpositiveelectrospray ionizationmode，selected reactionmonitoringoftheprecursor．productiontransitionsm／zof478．2 322．2(C1)，464．2 322．2(C2+C2a)， 450．2—÷322．2fC1a1forgentamicinandm／zof468．2—÷l63．1fortob