免疫学实验课 凝集反应.pptVIP

医学免疫学实验 -2- 凝集反应 1.试管凝集（操作，肥达反应） 2.玻片凝集（操作，血型鉴定） 本次实验内容 常见抗原抗体反应的种类（4大经典反应） 凝集反应 Agglutination Test 概念：细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结 合后形成凝集团块称凝集反应。 类型： ★直接凝集反应 ★间接凝集反应 ★间接凝集抑制试验 凝集反应原理图解（一） 玻片凝集：ABO血型鉴定 试管凝集：肥达试验 凝集反应原理图解（二） 血清学诊断：肥达试验 1.原理: -用已知伤寒杆菌的H、O抗原和甲、乙型副伤寒 杆菌H抗原，与病人血清作定量凝集试验，以测定患 者血清中有无相应抗体，根据抗体含量的多少及增长 情况，可辅助诊断伤寒及副伤寒。 已知抗原检测未知抗体 试管凝集试验 2. 方法：对倍稀释法 1 2 3 4 5 6 7 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 弃去 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 control 标记 加NS 加血清 加菌液 混匀 反应18－24h 倍比稀释 从第7管起 0.5ml 0.5ml 1:10血清 0.5ml 不加血清 3. 操作注意点 1). 倍比稀释 2). 吸头勿混, 注意吹打 3). 加菌液从第7管加起 4). 所有抗原完成后方摇匀 5). 观察结果勿振摇。 4. 结果观察 1. 观察勿振摇。 2. 从对照管观察起，后观察试验管。 3. 效价判定 ++++：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。+++：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。++：液体稍透明，管底有部分凝集沉淀物。+：液体较混浊，可见少量凝集物。-：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点 （与对照管相似）。 － 效价：出现50％凝集（部分凝集:++)血清最高稀释度为效价。 抗体 1:40 1:80 1:160 1:320 效价 O ++++ +++ ++ + H ++++ +++ ++ ++ PA - - - - PB - - - - O效价 H效价 诊断意义 ? ? － － － ? ? － 结果解释 正常参考值: H 1:160 O、PA、PB 1:80 动态观察:在病程中逐周复查,若效价递增或恢复期效价比初次高4倍以上说明有诊断意义。 感染可能性大 感染可能性小 恢复期，或预防接种 早期感染，或交叉反应 同种异型抗原： Blood type： ABO A B O AB antigen antibody A B － A,B anti-B anti-A anti-A, － anti-B Blood type 凝集 不凝集 anti-A anti-B 原理 操作 标记 抗A、抗B血清各1滴，分别滴于两侧 采血各1滴，牙签混匀，观察凝集。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *