酶固定化研究进展.pptVIP

* 酶固定化研究进展 胡鹏程、陈光 酶为什么要固定化 酶作为一种生物催化剂可以在常温常压下参与体内的各种代谢反应，具有高选择性，催化反应条件温和，无污染等特点，而且其数量和性质不会改变。 酶具有亲水性，与疏水性底物冲突；再者，通常的酶制剂是不可回收的，造成酶制剂成本昂贵；最后，受外界条件的影响，酶活性很不稳定。为了解决上述问题，固定化酶技术被提了出来。 文献目的 主要阐述了医药学、化工、食品制造等方面固定化酶的应用情况以及该技术的一些最新研究成果。 固定化酶简介 美国科学家Nelson和Griffn于1916年最早发现了酶的固定化现象。我国的固定化酶研究开始于1970年。直到20世纪60 年代，固定化技术才得到快速发展 固定化酶是一种酶工程的常见技术。酶将被吸附到一种惰性的低水溶性物质上即在一定空间内呈闭锁状态，能连续地进行反应。 与游离酶相比，固定化酶具有以下优点: 使酶在反应中被固定，从而易于从反应系统中分离，在较长时间内反复使用; 反应过程易控制，有助于提高酶的稳定性; 由于酶易与底物和产物分开，产物增加。它在工业和医药等方面有着诱人的应用前景。 固定化方法 吸附法是酶与载体表面之间以范德华力（离子键，氢键，疏水作用）结合，往往较弱，使得酶与载体结合不牢，易脱落。但由于使用价格低廉，载体可重复使用，酶便于回收。这是酶固定化技术中最经济的方法。其缺点是可能会由于吸附剂引起酶变性。 宋宝东等人对源于Candida rugosa的脂肪酶在吸附树脂AB-8载体上进行了吸附固定，固定化后酶活损失约30%，但稳定性提高约60%. 固定化方法 包埋法是高聚物和酶单体之间的聚合，即为了将酶固定化，使酶被包埋在聚合物中，从而实现酶的固定化的方法。酶活回收率较高。该方法基本上没改变酶的结构，仅仅是将酶固定在聚合物形成的网格或微胶囊中。常用的包埋载体有海藻酸钠、明胶等。其缺点是对酶的体积有要求。这是因为酶体积太大，会被聚合物形成一定的空间阻碍，影响包埋的过程。 Bomscheur等人利用水性表面活性胶粒用乳液包埋，将酶相分离出来。 固定化方法改进 通过现有的技术手段如声、光、电的应用可以得到很多新的产品。于是，这些方法也被广泛应用于酶固定化技术的改良中。目前，对于固定化技术的改进大多集中于制备新型固定化酶。制备新型载体，改变微环境增强酶活性以及进行化学修饰来增强反应活性等。 举例 黎刚将脲酶共价结合到PES膜的表面。利用远紫外光辐射含芳香叠氮基的光活性酯，造成叠氮基光解生成氮烯，从而能够插入 PES膜表面的C-H键形成仲胺。 宋子风等人制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料，并作为固定化酶载体，酶解标准蛋白质后肽段的氨基酸序列覆盖率达95%以上。 *