海洋真菌H3次级代谢产物分离研讨.pdfVIP

福建蠹玎 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 海洋真菌H．3次级代谢产物分离研究+ 陈融郑忠辉黄耀坚宋思扬木 005) (厦门大学生命科学学院，细胞生物学与肿瘤细胞教育部重点实验室，福建厦门361 摘要：本文通过对一株红树植物内生真菌菌株H．3(Aschersoniasp．)培养基的优化，发现添 加I％(NH4)2S04的半海水淀粉培养基可以显著提高该菌株代谢产物的抗人口腔表皮样癌KB 细胞的活性。对该菌株的代谢产物应用包括真空柱层析、高效液相色谱等在内的现代色谱方 法进行了分离纯化，获得单体化合物5个，经x一射线晶体衍射、EI质谱与核磁共振波谱的解 析，鉴定这5个化合物分别为2，3，4．三羟基四氢呋喃、1，2一氧萘酮、琥珀酸、1，2,4一三羟基苯 和一个脂肪酸。对各化合物的抗菌、抗肿瘤的生物学活性进行了测定，结果显示化合物1，2一 氧萘酮具有很好的抗菌活性。化合物l，2，4．三羟基苯对MG．63和Raji细胞有抑制作用。 关键词：海洋真菌；抗菌活性；抗肿瘤活性；化合物分离 海洋真菌不是一个特定的分类概念，而是根据其生态及生理特性而定义的一个类群。 Kohlmeyer将专性海洋真菌定义为那些只在海洋或河口(半咸水)地区生长及产孢的真菌，而兼 性海洋真菌则是那些陆源或来自淡水中的，也可以在天然海洋环境中生长的一类真菌【l】。从此 定义中可以看出，海洋真菌的范围很广，海水、底泥，海藻、珊瑚、甲壳类动物的体表或组 织内部，潮间带的红树林体内及腐叶中分离的真菌都可定义为海洋真菌。 海洋占地球表面积的五分之三以上，海洋生境的生态多样性及物种多样性均高r陆地生 境。高盐度、高压、低营养、低温或局部高温、无光照的特殊生境，使海洋生物具有与陆生 生物不同的生理性状，并产生许多结构新颖、作用特殊的活性物质【2j。 海洋真菌代谢产生的天然产物包括药品、食品、饲料、色素、信号递质、酶、辅酶、酶 抑制剂和激活剂等与人类生产、生活密切相关的产品。利用海洋真菌生态环境的复杂和多样 性，分析其代谢产物，以期生产各种结构新颖且生理活性独特的海洋天然产物，无疑将是海 洋真菌研究与开发的主要方向【3】。本文对一株分离自红树植物的内生真菌H．3的次生代谢产物 进行了研究。 1材料和方法 1．1材料 真菌菌株H一3分离自福建九龙江口浮宫草埔头红树植物桐花树树皮。经鉴定为赤座梭孢 sub矗lisATCC 属(Aschersonia 9372)，金黄 sp．)真菌。拮抗指示菌：枯草芽孢杆菌(Bacillus aureusATCC25923)，大肠杆菌(EscherichiacoliATCC25922)， 色葡萄球菌(Staphylococcus +国家“863’’计划项目(2003AA624010)福建省科技计划项目(2004N003)资助 4通讯作者。Email：sysong@xmu．edu．ca 227 福建曩n 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19．23 albicansAs 30005)。以上菌 白色假丝酵母(Candida 21538)，黑曲霉(AspergillusnigerACCC 株均为本实验室保存菌种。受试肿瘤细胞株人口腔表皮样癌KB细胞，人成骨肉瘤MG一63细 胞，人B淋巴瘤Raji细胞购自中国科学院上海细胞研究所。其它试剂如无特别说明，为国产 分析纯试剂。 1．2方法 1．2．1 H．3菌株培养 菌株经由掺加50％海水PDA斜面培养基活化出孢(约7-10d)；将孢子用无菌水洗下，孢