胡杨耐受盐胁迫分子机制初步研究.pdf

胡杨耐受盐胁迫分子机制初步研究 摘要 胡杨耐受盐胁迫分子机制初步研究 摘要 杨柳科杨属的胡杨(Populuseuphra矗caOily)具有极强的耐受干旱和盐渍的能 力。关于它耐受盐胁迫的生理特征有大量报道，而对其抗盐的分子机制鲜有报道。 Salt Sensitive 本文通过对胡杨PeSOSl(PopuluseuphraticaOverly 1)基因的功能 鉴定分析和表达特性研究，结合胡杨在盐处理下不同器官离子浓度变化的研究， 对胡杨的耐受盐胁迫分子机制进行了探讨，结果如下： 结果表明PESOSl可显著恢复突变菌株对高盐的敏感性，与阴性对照相比，在 200m mol／LNaCI胁迫下，转基因细菌中Na+离子含量有所降低，K+含量明显增 加，K+／Na+增加较多。说明PESOSl基因具有与大肠杆菌NaⅥr逆向转运蛋白 基因相似的功能。 mM 半定量RT-PCR分析结果表明，在200NaCI处理下，PESOSl的转录水平 迅速增加，并且随着处理时间的增长而升高。使用制备的特异性PESOSl抗体进 多，而在茎中表达增加不明显。说明PESOSl的表达受盐诱导，并且有一定的组 织特异性。 为了确定PESOSl蛋白在细胞内膜结构上的分布，提取胡杨的质膜和液泡 膜，使用特异性PESOSl抗体进行免疫杂交实验。结果表明在质膜微囊中能检测 到PESOSl蛋白分布，而在液泡膜微囊中检测不到。说明我们研究的胡杨Na+，Ir 逆向运转蛋白是一个定位于质膜的通道蛋白，这结果跟同源性分析的结果一致。 盐胁迫下胡杨根茎叶离子相对含量测定和PESOSl在植株内的表达特异性 分析表明，在更需要保证相对较低的Na+离子含量和保持K+，Na+稳定的叶片和 根中，PESOSl的表达较多，说明其作为外排Na+离子的重要蛋白在胡杨耐受盐 胁迫分子机制中有重要作用。 关键词：胡杨；PESOSl：功能互补；Western—blotting：K*／Na+； 胡杨耐受盐胁迫分子机制初步研究 Abstract studiesonmolecularmechanismofsalt Preliminary toleranceof P．euphratica Abstract member famousforitsabi— oliv，a ofPopulus，Salicaceae，is Populuseuphratica toendure arc re．archesaboutits lity highsalinity．Theremany physicologicalchang- esundersalt littleisknownonitsmoleculermechanismofsalttolerance． stress，but studiedthe of ofivSalt Sen· Here,we expressionPeSOSl(PopuluseuphraticaOverly sitive theelementsratio 1)，a P．euphraticaNa+／H+antiporter,andanaly∞d putative different aftersalttreatment． of organsof只euphr