降钙素基因相关肽在气道上皮损伤修复中的作用研究.pdf

摘要 目的：研究降钙素基因相关肽对气道上皮损伤后修复过程的影响， 并探讨其胞内信号转导途径。 方法：(1)CGRP对人气道上皮损伤修复的影响：以人支气管上皮 细胞(humanbronchial epithelialeelIs，耶ECs)株为研究对象， 观察CGRP对HBECs损伤修复指数的影响；免疫细胞化学方法检测 S 制剂PD98059对CGRP促损伤修复作用的影响；采用凝胶迁移滞后实 element 验(EMSA)检测cAMP反应元件结合蛋白(cAIV[P response binding 力的影响及PKC、MEK信号途径在其中的作用。 结果； 1．CGRP对人气道上皮损伤修复的影响 (1)在体外培养的HBECs细胞层机械刮擦造成缺损。24h后，对 照组缺损处已全部长满，损伤修复指数(RI)为4．3。随着cGRP浓 度的增加，10‘10mol／L～10—7mol／LCGRP可使HBECs的损伤修复速度 明显增快，R1分别为5．8、6．1、6．7、7．6。与对照组相比，差异具 呈浓度依赖性。 Ki67的表达。 CGRP可明显促进HBECs (3)与对照组相比，加入CGRP(101 胞周期发生明显变化，S期细胞百分比由(31．3±3．5)％上升到(49．4 i．9)％， (po．05)。结果表明，CGRP可明显增强HBECs的增殖。 2．CGRP促HBECs损伤修复的胞内信号转导的研究 见CGRP发挥促HBECs损伤修复作用与PKC和MAPK途径有关。 (2)与对照组相比，CGRP处理组皿ECsLI值明显增大，加入H一7 效应的发挥与PKC及MAPK途径有关。 (4)与对照组相比，CGRP可显著提高HBECsCREB与DNh的结合 与CGRP处理组相比，CGRP+PD98059组HBECsCREB与DNA的结合活 性无明显变化。可见， CGRP可显著提高HBECsCREB与DNA的结合 活性，其效应的发挥与PKC途径有关，而与MEK途径关系不明显。 结论： 1．CGRP可加快HBECs的损伤修复过程。 2．CGRP可促进HBECs的增殖。 内信号转导途径有关。 4．CGRP可通过PKC提高HBECsCREB与DNA的结合活性。 关键词： 降钙素基因相关肽，支气管上皮细胞，损伤修复，CREB ABSTRACT objective：ThepresentWaS to theeffects studydesignedinvestigate ofcalcitonin wound of gene—relatedpeptide(CGRP)onrepairairway andthe transductioninthe epitheliumcorrespodemsignal pathways process· influence Methods：(1)TheofCGRPonwound ofhuman repair bronchial wound epithelialcells(HBECs)：therepairindex(RI)was determined woundarea 4hoursin24hours by