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[农学]河南工业大学 第六章 微生物的生长
* * 第六章 微生物的生长 (Microbial Growth) 生长(Growth):是指细胞物质有规律地、不可逆增加的生物过程。 繁殖(Reproduction):是微生物生长到一定阶段导致产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的整个生物学过程。 两个概念 第一节 微生物生长的测定 一、测生长量 (一)直接法: 1、测体积法 2、称干重法 1、比浊法 2、生理指标法 (二)间接法 菌液浓度 吸光值(OD值) 测含氮量法 蛋白质总量=含氮量×6.25; 细胞总量=蛋白质总量/(50%~80%)=蛋白总量×1.54 测含碳量以及测磷、DNA、RNA等。 产酸、产气、耗氧、粘度和产热等。 二、计数测定 1、直接计数法 2、平板计数法 平板菌落计数法 3、比例计数法 将已知颗粒浓度的液体与一待测细胞深度的菌液按一定比例均匀混合,在显微镜视野中测出各自的数目,然后求出未知菌液中的细胞浓度。 第二节 单细胞非丝状微生物的生长 一、单细胞非丝状微生物个体生长 1、细菌的个体生长 DNA的复制 细胞壁的扩增 细胞的分裂 2、酵母菌的生长 二、单细胞非丝状微生物群体生长 微生物接种到一个新的环境,暂缺乏足够的能量和必需的生长因子。 “种子”老化(即处于非对数生长期) 或未充分活化。 1、延滞期出现原因 (一) 延滞期(Lag phase) 2、延滞期的特点 1)生长速率常数为零。 2)细胞形态变大或增长; 3)合成代谢十分活跃,易产生各种诱导酶; 4)对外界不良条件反应敏感。 3、影响延滞期时间长短的因素 A、菌种特性 B、接种龄: 以对数期接种龄的种子接种,延滞期短。 C、接种量:发酵工业上通常采用种子:发酵培养基=1:10 D、培养基成分:一般要求发酵培养基的成分或种子培养基的成分尽量接近,且应适当丰富些。 (二)指数期 (Exponential phase) (二)指数期 (Exponential phase) 1、特点 1)生长速率常数R最大、代时最短,生长速度最快; 2)细胞稳定(平衡)生长:细胞内各种物质按比例生长,菌体成分均匀; 3)酶系活跃,代谢旺盛。 2、三个重要参数: 繁殖代数、生长速率常数、代时 A 繁殖代数(n) X2 = X1 ╳ 2n 取对数表示 2 生长速率常数:单位时间内繁殖的代数。 代时(G):每增殖一代所需的时间。 计 算 题 某一时间细菌的初始量为100个,经400分钟培养后达到10亿,试计算该细菌的世代数和世代时间。(假设培养过程中细菌始终处于对数生长期,lg2=0.301) (三)稳定期 (Stationary phase) (三)稳定期 (Stationary phase) 1、出现原因 A、营养的消耗。 C、引起pH值、EH值的改变。 D、有害代谢产物积累。 B、营养物的比例失调。 1)生长常数为零,新生=死亡,达到动 态平衡; 2)活菌数的总量达到最大值; 3)某些芽孢菌的芽孢开始形成; 4)某些细菌过量积累次级代谢产物,如抗生素、维生素、储藏物等。 2、特 点 (四)衰亡期 (Death phase) 特 点: 1)细胞活性降低,细胞衰老并出现自 溶; 2)细胞产生或释放出一些产物,如氨 基酸、转化酶、外肽酶和抗生素等。 3)菌体细胞呈现多种形态,有时产生 畸形,细胞大小悬殊。 (四)衰亡期 (Death phase) 第三节 丝状微生物的生长 1、菌丝呈顶端生长 2、没有对数生长期 第四节 物理因素对微生物 生长的影响 (一)温度影响微生物生长的一般规律 最低温度:微生物能生长的最低温度界限。 最适温度:微生物生长繁殖速度最快的温度。 最高温度:微生物能生长的最高温度界限。 微生物生长温度“三基点” 一、温 度 温度对微生物生长的影响机制 (1)影响酶活性,最终影响细胞物质合成。 (2)影响细胞质膜的流动性,从而影响营养物质的吸收。 (3)影响物质的溶解度。 (二)不同微生物类群适应的温度范围 60—90 ℃ 35—47 ℃ 30—35 ℃ 15—20 ℃ 55—75 ℃ 30—40 ℃ 25—30 ℃ 12—15 ℃ 40—45℃ 5—15 ℃ -5—5 ℃ -5—5 ℃ 嗜热微生物 嗜温微生物 冷育微生物 嗜冷微生物 最高生长温度 最适生长温度 最低生长温度 微生物类群 (三)高温和低温对微生物的影响 1、高温的影响 引起菌体蛋白质等大分子物质的变性 影响高温效应的因素 菌种与菌龄 高温延续的时间 菌体所处介质 菌体密度 (二)高温和低温对微生物的影响 2、低温对微生物的影响 降低代谢
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