dna甲基化对小麦根系早期生长发育影响的分析word格式论文.docxVIP

首都师范大学摘要本研究以普通小麦(京 411) 为实验材料， SAM 为甲基供体，从形态学、细 胞学和分子生物学三个层面进行研究，试图阐明 DNA 甲基化对小麦初生根生长 发育的影响。实验结果表明:(1) SAM 处理对小麦初生根的生长具有抑制作用，而且这种作用存在一 定的剂量和时间依赖性，即随着 SAM 浓度的增大和处理时间的延长，抑制作用 呈现加强的趋势。(2)DNA 甲基化水平的升高与 SAM 浓度和处理时间存在正相关，即在一 定范围内， SAM 浓度越高，处理时间越长， DNA 甲基化水平也会越高。(3)细胞有丝分裂指数的变化与 SAM 处理之间存在负相关，即随 SAM 浓 度加大和处理时间延长，细胞有丝分裂指数呈下降趋势。也就是说， DNA 甲基 化程度的增加会导致细胞有丝分裂指数的下降。(4)利用 pH3-10 和 pH4-7 两种不同 pH 梯度胶条，经考马斯亮兰染色显示 和 ImageMaste?M2D Platinum software Cversion 5.0) 软件分析后，在双向电泳凝 胶上各自检测到 500 和 600 个左右的蛋白点。仔细分析分离效果较好的 pH4-7 双向聚丙烯酷肢凝胶电泳的结果， 20μmol/L SAM 处理时，共检测到 17 个蛋白点 表达上词， 22 个蛋白点表达下调; 80μmol/L SAM 处理时，共检测到 13 个蛋白 点表达上调， 29 个蛋白点表达下调:两种处理均无明显的特异表达点。这些蛋 白的序列及其功能信息还有待于进一步鉴定。(5)由于探针选取的问题， Northem 杂交未能得到确切结果，{E[根据形态学 和细胞学研究结果推测， DNA 甲基化水平的升高很可能抑制了控制细胞分裂和 生长的基因的转录和表达，进而影响了小麦根尖细胞有丝分裂和初生根的生长发 育。关键词=小麦， DNA 甲基化，形态学观察，细胞有丝分裂指数，双向聚丙烯航 服凝胶电泳首都师范大字AbstractIn paper，the seeds of Triticum aestivum L.(Jing 411) were treated by different concentrations of SAM，the methyl-donor ，to understand th巳 effect of DNA methylation on 由e growth and development of the primary root under the levels of morpholo町 cytology and molecular biologyThe results are as follows:(1)The growth of wheat primary root was inhibited by the treatment of SAM， and the inhibition was dependent on the dose of SAM as well as the treated time.The increase of DNA methylation was correlated positively with the concentration of SAM and the time of culture，too.There was negative correlation between the mitotic index and the extend of DNA methylation. That is to say，the mitotic index decreased while the the extend ofDNA methylation increased.500 spots on the gels with a pH3-1 0 gradient and 600 spots on the gels with a pH4-7 gradient were observed ，respectively ，when the gels were stained by Coomassie blue and analyzed by ImageMasterTM2D Platinum so企ware (version 5.0). Comparingthe control with the treatment in 20μmol/Land 80μmol/L SAM，respectively ，about 17and 13 proteins were checked up-regulated ，and 22 and 29 spots were down-reg