dq12对thp1细胞基质金属蛋白酶9的影响及松弛素干预作用word格式论文.docxVIP

本课题受如下基金资助松弛素对矽尘肺纤维化的拮抗作用及机制(国家自然科学基金青年科学基金项目，项目编号独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果 的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体 已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明 确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授 权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√” ）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录全 文 缩 写 词 I中文摘要 IIAbstract IV前言1一、材料和方法 31主要试剂和仪器 32染毒及主要指标测定 73统计分析 10二、结果12 1DQ12 作用于 PMA 刺激的 THP-1 细胞122DQ12 对 PMA 刺激分化的 THP-1 细胞基质金属蛋白酶-9 mRNA 的表达、基质金属蛋白酶-9 酶活性的影响 133Relaxin 对 DQ12 作用的 PMA 刺激分化的 THP-1 细胞基质金 属蛋白酶-9 mRNA 的表达、基质金属蛋白酶-9 活性的影响 14三、讨论15参考文献19综述24附录37 致谢 错误！未定义书签。全 文 缩 写 词（List of Abbreviation）DQ12German standard quartz德国标准石英MMPsMatrix metalloproteinase基质金属蛋白酶MMP-9Matrix metalloproteinase-9基质金属蛋白酶-9TIMP-1Tissue Inhibitor of Metalloproteinases-1基质金属蛋白酶组织抑制剂-1PMAPhorbol-12-myristate-13-acetate佛波酯AMAlveolar macrophages肺泡巨噬细胞LPSLipopolysaccharide磷脂酸BALFBronchoalveolar lavage fluid支气管肺泡灌洗液TGF-βTransforming growth factor-β转化生长因子-βRXFP1Relaxin receptor 1松弛素 1 型受体DMSODimathyl sulfoxide二甲基亚砜EBEthidium bromide溴化乙锭DQ12 对 THP-1 细胞基质金属蛋白酶-9 的影响及松弛素干预作用 研究生：辛志强 指导老师：刘爱林中文摘要研究目的研究 DQ12 对佛波酯（PMA）诱导分化的 THP-1 细胞的基质金属蛋白酶-9 mRNA 表达、酶活性的影响以及松弛素（relaxin）的干预作用。研究方法RPMI-1640 培养基培养 THP-1 细胞，于对数生长期接种于 6 孔板，调整细胞 浓度 8×105/ml。10ng/ml 的 PMA 刺激 THP-1 细胞 24h 后无血清培养 3h，然后分 为对照组、DQ12 组、DQ12+R 组；对照组无血清培养基培养、DQ12 组含 100ug/ml DQ12 的无血清培养基培养、DQ12+R 组含 100ug/ml DQ12 和 10ng/ml 的 Relaxin 培养，于 1h、3h、12h、24h 吸取培养液、收获细胞。培养液分装、-80℃冻存， 明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9 活性；提取 THP-1 细胞 RNA，qRT-PCR 检测 基质金属蛋白酶-9 mRNA 的表达。研究结果DQ12 组 THP-1 细胞基质金属蛋白酶-9 mRNA 的表达于 12h 开始增加，24h 维持在增高水平(P0.01)；与对照组比较，DQ12 组 THP-1 细胞基质金属蛋白酶-9 活性于 1、3、12、24h 均增强(P0.01)。DQ12+R 组与 DQ12 组比较，降低 3、12、24 基质金属蛋白酶-9 mRNA 的表 达(P0.05)；基质金属蛋白酶-9 活性差异没有统计学意义（p0.05）。研究结论DQ12 增加 PMA 诱导分化的 THP-1 细胞的基质金属蛋白酶-9 mRNA 表达和 酶活性。Relaxin 对 DQ12 诱导的基质金属蛋白酶-9 mRNA 表达增高有抑制作用， 对基质金属蛋白酶-9 活性的影响不明显。本研究结果提示 relaxin 可能通过影响肺泡巨噬细胞基质