egcg诱导前列腺癌细胞pc3的凋亡及对survivin蛋白表达的影响word格式论文.docx

1独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日2目录中文摘要……………………………………………………………………Ⅰ ABSTRACT…………………………………………………………………Ⅲ 符号说明……………………………………………………………………Ⅵ 前言……………………………………………………………………………1EGCG诱导前列腺癌PC-3的凋亡及对Survivin蛋白表达的影响…………4 1材料及方法…………………………………………………………………41.1 实验材料……………………………………………………………………41.2 实验方法…………………………………………………………………52 实验内容……………………………………………………………………72.1 倒置显微镜下观察细胞形态……………………………………………72.2 细胞增值曲线实验（CCK-8 法）………………………………………72.3 细胞集落形成实验（克隆形成法）……………………………………82.4 流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率………………………………92.5 RT-PCR检测SurvivinmRNA的表达…………………………………10 2.6Westernblot检测Survivin蛋白的表达…………………………………12 2.7 统计分析…………………………………………………………………163 实验结果…………………………………………………………………173.1 EGCG 处理后的细胞生长状态观察……………………………………173.2EGCG对PC-3细胞增殖活性的抑制作用………………………………183.3EGCG作用PC-3细胞的集落形成实验…………………………………193.4EGCG对PC-3细胞周期和凋亡的影响…………………………………203.5EGCG对PC-3细胞SurvivinmRNA表达的影响………………………2233.6EGCG对PC-3细胞Survivin蛋白表达的影响…………………………234 讨论………………………………………………………………………235结论………………………………………………………………………27 参考文献………………………………………………………………………27 附录……………………………………………………………………………33 文献综述………………………………………………………………………33 综述参考文献…………………………………………………………………37EGCG诱导前列腺癌细胞株PC-3的凋亡及对Survivin蛋白表达的影响中文摘要目的初步探讨不同质量浓度表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocat-echin-3-gallate，EGCG)对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增值及凋亡的影响及对Survivin蛋白表达的变化，从而为EGCG在雄激素非依赖性前列腺癌(AndrogenIndependentProstateCancer,AIPC)的临床治疗中提供理论依据。方法1.使用不同质量浓度的EGCG(0、20、40、80μg/ml)处理前列腺癌细胞株PC-3，倒置显微镜下观察细胞的形态学改变。2.使用不同质量浓度的EGCG(0、20、40、80μg/ml)处理前列腺癌细胞株PC-3，通过细胞增值曲线及克隆形成实验检测EGCG对PC-3 细胞增殖的影响。3.流式细胞仪检测EGCG处理PC-3细胞株48h后，不同质量浓度(0、20、40、80μg/ml)EGCG 对PC-3 细胞周期及凋亡的影响。4.用RT-PCR法检测不同质量浓度(0、20、40、80μg/ml)EGCG作用48h后，S