nm23Ki-67在原发性胆囊癌中表达及意义.docVIP

nm23Ki-67在原发性胆囊癌中表达及意义 　　 摘 要 目的：研究胆囊癌组织中nm23、Ki-67的表达水平与胆囊癌临床生物学行为的关系。方法：采用免疫组化SP法检测57例原发性胆囊癌中MMP-2、nm23、Ki-67的表达。结果：nm23在胆囊癌中表达率为64.9%，慢性胆囊炎的腺体中表达率为23.5%；高分化胆囊癌中表达率为69.6%，中分化胆囊癌中表达率为66.7%,低分化胆囊癌中表达率为56.2%，转移组表达率为48.5%，非转移组表达率为87.5%；Ki-67在胆囊癌中表达率为68.4%，慢性胆囊炎的腺体中表达率为11.8%；高分化胆囊癌中表达率为56.5%，中分化胆囊癌中表达率为61.1%,低分化胆囊癌中表达率为93.8%，转移组表达率为81.8%，非转移组表达率为50.0%。结论：nm23、Ki-67的联合检测可作为临床判断胆囊癌转移潜能及治疗预后的参考指标。? 　　关键词 胆囊癌 免疫组化 nm23 Ki-67? 　　doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.03.199?? 　　原发性胆囊癌是一种较少见的消化道恶性肿瘤，早期诊断困难恶性程度高，预后差。癌的过度增殖和转移是影响胆囊癌预后的重要因素，本研究采用免疫组化方法对57例胆囊癌中的nm23、Ki-67的表达情况进行分析，以探讨nm23、Ki-67的表达与胆囊癌的发生及转移的关系。? 　　资料与方法? 　　一般资料：2000年4月～2011年4月收集手术切除的胆囊癌存档蜡块57例，男32例，女25例，年龄36～75岁，平均52.4岁。依据组织学特点，其中高分化23例，中分化18例，低分化16例；依据有无淋巴结或或远处转移分为转移组(Nevin Ⅳ、Ⅴ期)33例，非转移组(Nevin Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)24例。所有患者均为首次发现，未经化疗或放疗并行手术切除，切除标本均经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋。另选取单纯性慢性胆囊炎的存档蜡块17例作为对照。? 　　方法：所有标本作4μm连续切片，免疫组化染色。用免疫组化SP法检测，兔抗nm23单克隆抗体、鼠抗Ki-67单克隆抗体及SP试剂盒购自福建迈新生物技术有限公司。染色程序严格按照试剂盒内说明书进行，用PBS缓冲液代替nm23单抗和Ki-67单抗做阴性对照。? 　　结果判断标准：nm23蛋白阳性表达为胞浆内见棕黄色颗粒，Ki-67蛋白阳性表达为核内见棕黄色颗粒。随机观察10个高倍镜视野，计数显色细胞所占比例，将表达情况分为阴性(-)即显色细胞数＜10%和阳性(+)即显色细胞数≥10%两级。? 　　统计学处理：应用SPSS13.0统计软件分析，采用X2检验及相关性检验，P＜0.05为差异有统计学意义。? 　　结 果? 　　nm23蛋白的表达：57例胆囊癌中有37例nm23蛋白阳性(64.9%)，17例慢性胆囊炎的腺体中4例nm23蛋白阳性(23.5%)，两组比较差异有统计学意义(X2=9.076，P=0.03)。23例高分化胆囊癌中16例阳性(69.6%)，18例中分化胆囊癌中12例阳性(66.7%),16例低分化胆囊癌中9例阳性(56.2%)，组间差异无统计学意义(P＞0.05)。转移组33例中16例阳性(48.5%)，非转移组24例中21例阳性(87.5%)，两组间比较，差异有统计学意义(X2=9.286，P=0.02)。? 　　Ki-67蛋白的表达：57例胆囊癌中有39例Ki-67蛋白阳性(68.4%)，17例慢性胆囊炎的腺体中2例Ki-67蛋白阳性(11.8%)，两组比较差异有统计学意义(X2=17.012，P＜0.001)。23例高分化胆囊癌中13例阳性(56.5%)，18例中分化胆囊癌中11例阳性(61.1%),16例低分化胆囊癌中15例阳性(93.8%)，组间比较，差异有统计学意义(X2=6.703，P=0.035)。转移组33例中27例阳性(81.8%)，非转移组24例中12例阳性(50.0%)，两组间比较，差异有统计学意义(X2=6.510，P=0.011)。? 　　nm23与Ki-67蛋白表达的相关性：nm23、Ki-67共阳性21例，共阴性2例；nm23阳性伴Ki-67阴性16例，nm23阴性伴Ki-67阳性18例,；nm23表达与Ki-67表达呈负相关性(C=-0.341，P=0.009)。? 　　讨 论? 　　nm23基因是美国的Steeg等从小鼠黑色素瘤细胞中分离出来并确定的转移抑制基因，其编码的蛋白有H1和H2两个亚型，能抑制肿瘤细胞的转移。该基因的低表达已被证实在多种肿瘤中与高转移潜能呈负相关，有学者认为可以作为判断预后的指标。本研究发现nm23蛋白在胆囊癌和慢性胆囊炎腺体中的表达有差异，说明nm23蛋白的表达与胆囊癌的