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2018-06-03 发布于上海
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sema 3a对树突状细胞b7 h4表达的影响-effect of sema 3a on b7h4 expression in dendritic cells.docx

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sema 3a对树突状细胞b7 h4表达的影响-effect of sema 3a on b7h4 expression in dendritic cells

TheeffectionsofSema-3aontheexpressionsofB7-H4ondendriticcellsAbstract【Objective】TheeffectionsofSema-3aontheexpressionsofB7-H4ondendriticcells.【Method】training,identificationofBALB/cmousebonemarrow-derivedDC,bytheinterventionSema-3a-AbbyflowcytometrythedetectionofsurfaceexpressionofB7-H4factor;【Result】1.BALB/cmousebonemarrowcellsinvitroinducedtodevelopintoDC,andthepurityof82.18%;2.immatureDCandmatureDCwereexpressedB7-H4(8.24%±0.21%,17.38%±0.18%),anditsexpressioninmatureDCwashigherthannon-matureDC(P0.05);3.Sema3aantibodyinhibitedmatureDCexpressB7-H4(P0.05).【Conclusion】Sema-3AantibodycaninhibitthematurationofbonemarrowderivedDCsurfaceexpressionofB7-H4,suggestingthatSema-3AcanpromotetheexpressionofmatureDCB7-H4.【Keywords】Sema-3A,dendriticcells,B7-H4独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日正文引言树突状细胞（Dendriticcells，DC），因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名，是目前已知的专职的功能最强的抗原提呈细胞，是移植免疫、自身免疫性疾病、炎症反应及肿瘤治疗研究的热点。B7-H4又称B7S1和B7x，于2003年被发现，是最新加入B7家族的又一成员。B7-H4表达在专职抗原提呈细胞（APC）上，受白细胞介素10(IL-10)的诱导[1]，并广泛分布在非淋巴组织中。研究证实多种Semas分子介导DCs的免疫应答，参与对其生物活性和免疫功能的调节[2]。Sema-3a影响DC功能的机制尚不明确，本研究通过研究Sema-3a-Ab对DC表面B7-H4表达的影响，探讨Sema3a影响DC功能的可能机制。材料与方法1.1.1主要试剂RMPI1640全培养液含RMPI1640培养基（Gibco公司）、10％新生牛血清（FetalCalfSerum，FCS，Gibco公司）、100U/ml青霉素、100ug/ml链霉素及5×10-5M2-巯基乙醇(Amerco公司)。红细胞裂解液由本室配制。重组小鼠细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Recombinantmicegran-ulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactor，rmGM-CSF，RD公司）及重组小鼠白细胞介素4(Recombinantmiceinterleukin-4，rmIL-4，RD公司)，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS，Sigma公司）。流式单克隆抗小鼠CD11c（PE-anti-mouse-CD11c-antibody,abcam公司）。B7-H4（PE-anti-mouse-B7-H4-antidody,ebioscience公司）。1.1.2实验动物雄性BALB/c(H-2d)小鼠,6～10周龄，体重20～25g，由华中科技大学同济医学院器官移植研究所提供。本试验对小鼠的处置符合国家相关法律法规的要求，得到华中科技大学同济医院的实验动物伦理委员会的许可。1.1.3主要仪器流