玉米ga1-s基因的遗传定位及其杂交不亲和机理的研究-study on genetic mapping of ga1 - s gene in maize and its incompatible mechanism of hybridization.docxVIP
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- 2018-06-05 发布于上海
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玉米ga1-s基因的遗传定位及其杂交不亲和机理的研究-study on genetic mapping of ga1 - s gene in maize and its incompatible mechanism of hybridization
关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文,同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并向社会公众提供信息服务。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名:导师签名:日期:1.引言配子体基因(Gametophytefactor,Ga)是指那些影响单倍体配子有性传递的遗传因子。玉米第一个Ga基因(Ga1)是由(Correns.1902)发现,他当时观察到,用马齿型、硬粒型或甜玉米给一些爆裂型玉米授粉时不能结实;而反交,即用爆裂型玉米给马齿型、硬粒型或甜玉米授粉则可正常结实。研究表明,这些爆裂型玉米含有Ga1基因。一般来讲,ga花粉不能给显性纯合的Ga/Ga母本授粉结实,而Ga花粉则能给隐性纯合的ga/ga或杂合的Ga/ga母本授粉结实,这就是Ga所控制的单向杂交不亲和性;当Ga花粉和ga花粉混合给Ga/Ga或Ga/ga母本授粉时,Ga花粉对ga花粉有显著的竞争优势。在过去的几年里,人们加大了对Ga1-S的研究力度,因为不论在理论上还是在玉米生产实践上,对Ga1-S的研究,都具有重要意义。目前,Ga1-S的精确遗传定位国内外均未见报道,我国在Ga1-S领域的研究几乎是空白。1.1DNA分子标记在作物遗传育种中的应用DNA分子标记从二十世纪八十年代初到现在的近三十年里,有数十种分子标记技术相继问世。在构建生物体的分子遗传图谱、基因定位、基因克隆以及分子标记辅助选择等方面发挥重要的作用。迄今为止,已发展了多种以DNA为基础的分子标记,总结归纳起来主要包括以下三类:(1)基于PCR的分子标记:根据引物的特点分为三类:1)单引物PCR标记,包括RAPD、ISSR标记等;2)3’端具有选择性的双引物PCR标记,如AFLP标记;3)双引物特异PCR标记,包括SSR、CAPS标记等。(2)基于杂交的分子标记:RFLP标记,小卫星DNA标记。(3)其他一些新型分子标记:如SNP标记、STS标记、EST标记等。以PCR为基础的分子标记以PCR为基础的分子标记的发展是现今分子生物学发展最为迅速的一个方向。PCR技术具有快捷、简易、灵敏等优点,己被广泛的应用于分子克隆、DNA遗传疾病等的基因诊断、法医学、系统分类学、遗传学和育种学等研究领域,在标记技术的发展上起到了巨大的作用。RAPD标记RAPD标记就是随机扩增片段长度多态性,是(Williams.1990)和(WelshJandMcClellandM.1990)两个研究小组几乎同时提出的一种遗传标记技术。该标记技术的操作过程是通常为9-10碱基寡聚核苷酸的一系列随机引物,在低温退火条件下对基因组DNA进行PCR扩增,通过凝胶电泳和染色来检测扩增产物片段的多态性。作为一种单引物标记,RAPD标记的优点为:(1)有极大的丰富性,能反映整个基因组的变化;(2)极大的探测性,无需合成特定序列引物;(3)高效性与灵活性,可在短期内获得大量的多态性DNA片段,只要遗传特异性发生变化,即使亲缘关系非常近的个体也能识别;(4)简便、快速、费用低、分子识别率高、对环境污染小等。SSR标记(Tautzetal.1989)发现简单重复序列普遍的存在于真核生物的基因组中。(LittandLuty.1989)、(TautzD、WeberandMay.1989)三个独立的研究小组几乎是在同一时间建立了SSR标记技术,并且证实它作为位点特异的遗传标记具有巨大的潜力。和其它DNA分子标记相比,SSR的特点是:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,在数量方面没有生物学上的限制;(2)呈现多基因特点,信息含量高,表现为共显性遗传;(3)可采用PCR技术进行检测,且重复性好;(4)对DNA数量及纯度要求不高,即使是部分降解的样品也可;(5)其标记带型简单,记录的条带一致、客观、明确,能以引物序列的形式进行实验室间交流。ISSR标记ISSR标记是由(Zietkiewiczetal.1994)创建的一种简单序列重复区间扩增多态性分子标记。用于ISSR-PCR扩增的引物通常为16-18个碱基序列,由1-4个碱基组成串联重复和几个非重复的锚定碱基组成,由此该技术保证了引物与基因组DNA中SSR的5’或3’末端结合,扩增的是SSR序列之间的序列。与SSR-PCR相比,用于ISSR-PCR的引
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