孕期mvad通过rarα src和nr1信号通路影响仔鼠学习记忆功能机制的研究-study on the mechanism of mvad during pregnancy affecting the learning and memory function of offspring rats through rar α src and nr1 signaling pathways.docxVIP

英汉缩略语名词对照英文缩写VA英文全称Vitamin A中文全称维生素 AVANvitamin A normal维生素 A 正常VADVitamin A deficiency维生素 A 缺乏MVADmarginal vitamin A deficiency边缘型维生素 A 缺乏RARetinoic acid视黄酸atRAall trans-retinoic acid全反式视黄酸SFPSepcific-pathogen free无特殊病原RAREsRetinoic acid reaction elements视黄酸反应元件LTPlong-term potentiation长时程增强RARαRetinoic acid receptor alpha视黄酸核受体 αSFKsSrc family kinasesSrc 家族激酶Srcsarcoma gene肉瘤基因NR1N-methyl-D-aspartate receptor subunit 1N-甲基-D-天门冬氨酸受体 1RARsRetinoic acid receptors视黄酸核受体DMSODimethyl Sulfoxide二甲基亚砜ddH20PCRDouble distilled waterPolymerase chain reaction双蒸水聚合酶链反应Co-IPCo-immunoprecipitation免疫共沉淀NSEneuron-specific enolase神经元特异性烯醇化酶BSABovine serum albumin牛血清白蛋白DAPI4,6-diamidino-2-phenylindole4,6-二脒基-2-苯基吲哚PMSFPhenylmethanesulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟TrisTris(hydroxymethyl) aminomethane三羟甲基氨基甲烷APAmmonium persulphate过硫酸铵Ad-RFPAd-Red fluorescent protein红色荧光腺病毒Si-RARαSilence retinoic acid receptor alpha沉默视黄酸受体 α1Over-RARα LTDOverexpress retinoic acid receptor alphalong-term depression过表达视黄酸受体 α长时程减弱CNScentral nervous system中枢神经系统RARβRetinoic acid receptor beta视黄酸核受体 βRARγRetinoic acid receptor gama视黄酸核受体 γh，minHour，minute小时，分钟d，wDay，week天，周2孕期 MVAD 通过 RARα、Src 和 NR1 信号通路影响仔鼠学习记忆功能机制的研究1 摘要目的 探讨从孕期开始的 MVAD 对仔鼠成年期学习记忆功能影响 中，RARα 对 NR1 的影响是否通过调节 Src 来实现，并探讨 RARα、 Src 和 NR1 三者之间的联系。方法 构建孕期 VAN 和 MVAD 大鼠模型（VAN 组和 MVAD 组）； 分离培养两组新生鼠原代海马神经元，并利用细胞免疫荧光染色鉴定； 利用 real-time RCR 和 western blot 检测孕期 MVAD 和 VAN 组新生鼠海 马组织及原代海马神经元细胞 RA 诱导前后 RARα、SFKs 和 NR1 的 mRNA 和蛋白表达量；利用细胞免疫荧光检测 RA 诱导处理细胞前后 三个指标的荧光表达量；体外利用 RARα 沉默和过表达以及空载腺病 毒转染 VAN 组和 MVAD 组神经元细胞检测三个指标的 mRNA 表达量； Src 家族抑制剂 PP2 诱导处理神经元后，western blot 检测三个指标蛋白 表达量；利用免疫共沉淀检测 RARα 与 Src 以及 NR1 是否有相互作用； 利用钙影像仪检测对照及处理组细胞的钙兴奋性；利用 Morris 水迷宫 实验检测孕期 MVAD 和 VAN 组 7 周龄仔鼠空间学习记忆的能力。结果 ①成功构建了孕期 MVAD 和 VAN 孕鼠模型；②免疫荧光染1本课题受资助资金：国家自然科学基金青年基金，高等学校博士学科点专项科研基金（新教师类，20125503120006）3色显示，分离培养的新生鼠原代海马神经元 95%表达神经元标志物神经元特异性烯醇化酶（NSE）；③孕期 MVAD 新生鼠海马组织以及神经 元中 RARα、SFKs 和 NR1 的 mRNA 和蛋白表达量明显低于 VAN 组（P＜0.05）；④孕期 MVAD 组神经元钙兴奋性明显低于 VAN 组（P＜0.05）；⑤通过水迷宫实验发现孕期 MVAD 组生后 7W 仔