分子生物学第3章+生物信息传递(上)—从dna到rnaPPT.ppt

大肠杆菌 rRNA 前体加工过程 18S 5.8S 28S 18S-rRNA 5.8S和28S-rRNA 内含子 45S转录产物 剪 接 终产物 rDNA 基因间隔 哺乳动物细胞 rRNA 前体加工过程 5’端加帽 3’端加尾(polyA) mRNA的剪接 RNA的编辑 （三） 真核生物mRNA前体的加工 5’端的第一个核苷酸总是7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸（m7Gppp）。mRNA5’端的这种结构称为帽子（cap）。 1、在5’端加帽 m7Gppp 鸟甘酸转移酶 5′端加帽的作用： ① 保护mRNA，防止降解。 因为RNA酶的5′→3′ 外切酶活性不能裂解 三磷酸连接。 ② 增强mRNA的可翻译性。帽结合蛋白首先识别 和结合5′端帽子，促进mRNA与核糖体结合。 ③ 促进mRNA从细胞核运输到细胞浆。 ④ 增强mRNA的剪接效率。 5′端帽子对于第一个 外显子的剪接非常重要。 2、3’端加尾 多聚腺苷酸尾巴 AAUAAA： ★准确切割 ★加poly（A） 3′端poly（A）的作用： ①保护mRNA免于迅速降解； 提高了mRNA在细胞质中的稳定性。 ②促进mRNA的翻译效率。 除去poly（A）和poly（A）结合蛋白 （PABP）都会抑制翻译的起始。 3、mRNA的剪接——剪去内含子(P93) ① 5′端边界序列为 GU； 5′端保守序列5 ′GUPuAGU ② 3′端边界序列为 AG; ③ 距3′端18-40个核苷酸处有一个“分支点” ，一定 含保守A﹡， A﹡发动第一次转酯反应。 ④ 在3′端与“分子点”中间有一段富含嘧啶的区域。 核mRNA前体的剪接信号: 真核mRNA基因平均含有8-10个内含子。 多数核mRNA基因内含子遵循GU-AG法则。 ① snRNA种类：20多种，U族13种，其余为非U族。 ② U族snRNA特点： 尿嘧啶核苷酸占35％以上，故而得名； 5′端也有帽子结构(m32,2,7G-或mPPPN-)； 二级结构含有若干个发夹氏结构，极大保守； 剪接参与因素：snRNA与snRNP U族snRNA与蛋白结合构成 snRNP； snRNP与hnRNA结合成为剪接体，进行剪接； 参与mRNA剪切的snRNP包括U1、U2 、U4 、U5 、U6 剪接反应： 剪接过程 CAG=UAG》AAG》GAG 3 ′AG的剪接效率： 5’..AAGUAAGU …….CURAY..(10-40)…(U/C)11NCAG G….3’ Intron exon exon Polyprimidine CAG = UAG AAG GAG 生物体内内含子的主要类型：GU-AG 细胞核 pre-mRNA（真核）AU-AC 细胞核 pre-mRNA（真核）Ⅰ类内含子 细胞核 pre-rRNA（真核） Ⅱ类内含子 线粒体和叶绿体 pre-rRNA Ⅲ类内含子 细胞器 pre-mRNA双内含子 细胞器 RNAtRNA前体中的内含子 细胞核 pre-tRNA Ⅰ类内含子的自我剪接 最终形成稳定的线形产物 L-19，具有酶的活性和特征 Ⅱ类内含子的自我剪接 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 ● 真核生物转录起始复合物 真核细胞基本转录因子结构与功能 转录因子 功 能 TFⅡD 与TATA盒结合，起始点固定 TBP 与TATA盒特异结合 TAF 决定启动子和RNApol特异性 TFⅡA 稳定TFⅡD与TATA间的相互作用 TFⅡB 起始点选择，帮助其它因子进入， 与上游转录因子作用 TFⅡF 与RNApolⅡ结合，共同进入起始复合物 TFⅡE 与polⅡ相互作