胞外多糖依博素生物合成基因ste151719的功能研究-study on the function of exopolysaccharide ebstein biosynthesis gene ste 151719.docx

中国协和医科大学．中国医学科学院．博士学位论文缩略语一览表缸Apramycin阿普霉素Amptcillin氨苄青霉素娜姒BovinesⅢmalbumin牛血清白蛋白|5荚膜多糖capsularpolysacchande一Deoxyribonucleosidetriphosphate脱氧核(糖核)苷三磷酸肌Dithiothreitol二硫苏糖醇一Ethylenediaminotetraceticacid乙二胺四乙酸15exopolysaccharide胞外多糖GlucoseTris-HCl聊．AGTE缓冲液居-一Histidinetag组氨酸标签啪Isopropyl—p-thiogalactopyranoside异丙基硫代廿m半乳糖苷曲KiloBasepair千碱基对姬KiloDalton千道尔顿硒Kanamycin卡那霉素|5lipopob，saccharide脂多糖∞Opticaldensny光密度啷op∞readingframe开放阅读框架一Polyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳眦phosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液中国协和医科大学．中国医学科学院．博士学位论文PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应PEGpolyethyleneglycol聚乙二醇RNaseRibonuclease核糖核酸酶SDSSodiumdedecylsulfate十二烷基硫酸钠SDS．n～GEsDs—polyacrylaIIlidegelelectrophoresisSDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳SSCNaaCitrateSodiumSSC缓冲液眦强s-acetate，E叭bufferTAE缓冲液TE强s—HCl，EDl．ABufferTE缓冲液11EMEDN，N,N’’N’-telramethylethylenediamine四甲基7．--胺TllioThiostrepton硫链丝菌素-I_risTrihydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷X-gal5-bromo-4-chloro-3一indolyl·5-溴4氯一3一吲哚一p-D--半乳糖苷B．D-galactoside中国协和医科大学．中国医学科学院．博士学位论文原创性及知识产权声明1．本博士论文涉及的课题，从构思、设计、试验、资料整理及论文撰写均在中国协和医科大学医药生物技术研究所李元教授指导下完成。本论文中涉及的资料、结果等知识产权归属中国协和医科大学医药生物技术研究所所有。2．在本论文正常发表之前，知悉者负有保密义务，任何单位及个人均不得引用、复制或发表本论文之内容，更不得用于申报专利和成果。3．实验过程中曾得到许多同志的指导、帮助和支持，本人均已在论文中提出并致感谢。4．本论文中所有数据均来自原始实验纪录，引用资料均以注明，任何数据均无剽窃、篡改及抄袭之行为。5．如在本论文的原始性方面出现问题，我愿负法律责任。特此声明，以此为据。博士研究生：孙庆莉导师：李元2006年5月20日140中国协和医科大学．中国医学科学院．博士学位论文微生物胞外多糖的生物合成和组合生物学研究进展许多微生物能产生细胞表面多糖，在自然环境它们具有多种生物功能，保护微生物细胞免受环境压力及防止干燥，涉及微生物与固体表面的吸附过程，与动植物细胞的共生过程，以及病原微生物的致病性【1．21。细胞表面多糖包括脂多糖、荚膜多糖和胞外多糖。其中脂多糖(1ipopolysaccharides，LPS)与细胞膜结合；荚膜多糖(capsularpolysaceharides，CPS)包围在细胞周围，而胞外多糖(exopolysaceharides，EPS)分泌至细胞外环境中翻。EPSs化学结构多样，它们分为两类，由一种类型单糖分子组成的同多糖(homopolysaccharides)和由3-8种不同单糖构成的寡糖单元组成的杂多糖(heteropolysaccharides)。微生物EPSs是一种长链、高分子量聚合物，由成百上千个相同的寡糖重复单元聚合而成，其独特的物理学和流变学特性使它们在食品业和其他工业中作为稳定剂和增稠剂，广泛应用。其中由XanthomonascampestHs产生的黄原胶是一类最主要的商业用生物聚合物。具有重要的流变学特性，低浓度的黄原胶溶液就有很高的粘度和假塑性，它在很大的温度、pH值和电解质浓度范围内都很稳定，而且具有较高的耐剪切性；因而成为一种主要的商业用微生物多糖，广泛地应用于油业、食品、制药、化妆品、绘画和纺织等工业吲。乳酸细菌(Lac咖acidbacteria，LAB)产生的胞外杂多糖具有独特的物理学和流变学特性，因使用安全性在乳制品行业备受青睐IS]。目前研究发现，微生物来源的胞外