纳洛酮后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经保护作用-neuroprotective effect of naloxone postconditioning on focal cerebral ischemia-reperfusion injury in rats.docxVIP

山西医科大学硕士学位论文 山西医科大学硕士学位论文 纳洛酮后处理对大鼠局灶性 脑缺血再灌注损伤的神经保护作用 中文摘要 目的 本实验旨在通过建立在体大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，研究 纳洛酮后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经功 能障碍评分、脑梗死 面积及脑组织微管相关蛋白 2（MAP2）表达水平的影响，来探讨其对脑缺血再 灌注损伤后的神经保护作用及可能机制，为临床探索脑缺血再灌注损伤的药物 治疗提供帮助。 方法 将 60 只成年雄性 SD 大鼠(280-320g)随机分为 5 组（n=12），具体实 验方案如下：S 组为假手术组，其余各组接受 90min 的右脑局部缺血（MCAO） 和 24h 的再灌注；I/R 组为缺血再灌注组；N1 组为纳洛酮 1mg/kg 后处理组； N2 组为纳洛酮 6mg/kg 后处理组；N3 组为纳洛酮 10mg/kg 后处理组。在再灌注 即刻，大鼠腹腔注射用 0.9%氯化钠溶液稀释的纳洛酮 5ml(N1 组 1mg/kg、N2 组 6mg/kg、N3 组 10mg/kg)或等容量的 0.9%氯化钠溶液（S 组和 I/R 组）。 本实验采用线栓法建立大鼠的局灶性脑缺血再灌注损伤模型，即在颈总动 脉（CCA）分叉下方 1cm 处，将尼龙线栓置入 CCA，经分叉上行进入颈内动脉 （ICA），遇明显阻力表明线栓头端已进入大脑中动脉（MCA）起始处。开始计 时大脑中动脉阻断（MCAO）诱发的局部脑缺血，90min 后缓慢抽出尼龙线栓， 并开始再灌注计时。 于再灌注 24h 后采用四分法测定大鼠的神经功能障碍评分（NDS）；实验结 束后断头取脑采用 TTC 染色法测定脑梗死面积（以其同侧大脑半球面积的百分 比表示）（n=6），采用蛋白质斑迹技术测定双侧脑组织的 MAP2 的表达（n=6）。 结果 1.神经功能障碍评分（NDS）：与S组相比，I/R组、N1、N2和N3组 的 NDS评 分 均 显 著 升 高 (P0.05)； 与 I/R 组 相 比 ， N3组 的 NDS评 分 显 著 降 低 I I II (P0.05)，N1和N2组的NDS评分差异无统计学意义(P0.05)；与N1和N2组相比， N3组的NDS评分显著降低(P0.05)。2.脑梗死面积：与S组相比，I/R组、N1、 N2和N3组的脑梗死面积均显著增大(P0.05)；与I/R组相比，N3组的脑梗死面积 显著减小(P0.05)，N1和N2组的脑梗死面积差异无统计学意义(P0.05)；与N1 和N2组相比，N3组的脑梗死面积显著减小(P0.05)。3. MAP2的表达水平：与S 组相比，I/R组、N1、N2和N3组缺血侧MAP2蛋白的表达均显著降低(P0.05) ； 与I/R组相比，N3组缺血侧MAP2蛋白的表达显著升高(P0.05)，N1和N2组缺血 侧MAP2蛋白的表达差异无统计学意义(P0.05)；与N1和N2组相比，N3组缺血 侧MAP2蛋白的表达显著升高(P0.05)。 结论 通过本研究，我们得出以下结论： 1.在局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠，大剂量纳洛酮后处理具有显著的神经 保护作用，表现为脑梗死减少和神经功能障碍改善。 2.纳 洛 酮 后 处 理 的 神 经 保 护 作 用 存 在 剂 量 相 关 效 应 ， 只 有 在 大 剂 量 下 (10mg/kg)才能得以体现。 3. 纳洛酮后处理的神经保护效应与 MAP2 蛋白表达增强高度相关。 关键词 纳洛酮后处理；脑；缺血再灌注；神经保护；微管相关蛋白 2 PAGE PAGE III Neuroprotective Effects of Naloxone Postconditioning on Focal Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury in Rats Abstract Objective Through setting up big rats focal cerebral ischemia reperfusion injury animals model, to investigate naloxone postconitioning on focal cerebral Ischemia- reperfusion injury in rats after neurological defictit scored,infarct size and the expression of microtubule-associated protein 2(MAP2) to explore neuroprotecti- ve effects and possible mechanism.And give hel