铅暴露对sh—sy5y细胞基因表达和总甲基化水平的影响-effects of lead exposure on gene expression and total methylation level in sh - sy5y cells.docxVIP

3细胞在50μmol/l和100μmol/l铅中暴露七天，总DNA甲基化水平和对照组相比分别减少至6.8%和10.6%。结论:醋酸铅可能通过改变APP和DNMT1基因的表达来产生神经毒性，其机制可能与改变神经细胞基因的总甲基化水平有关。关键词：铅SH—SY5Y细胞基因表达甲基化LeadexposureinSH—SY5YcellsinfluencethemRNAexpressionandtheglobalDNAmethylationCandidate：WangLijunSupervisor：Prof.HuangQiAbstractObjective:ToresearchLeadacetateExposureinSH—SY5YCellsinfluencetheexpressionofgeneAPPandDNMT1andtheglobalDNAmethylation.Methodsandresults:CultivatetheSH--SY5Ycells,andexposedthemtodifferentconcentrationsofleadacetatesolution,usingtheMTTmethodtodetectdifferentdosesofleadacetateeffectSH—SY5Ycellgrowthcurve.TheDNAmethyltransferase1(DNMT1)andtheAPPmRNAexpressionlevelwereinvestigated.TheresultsshowedthattheexposureofthetwoconcentrationsofPbacetatecouldmaketheAPPmRNAupregulationandtheDNMT1mRNAdownregulation.Theglobalmethylationpatternwasreducedby6.8%and10.6%after7daysexposure;andtheDNAmethyltransferase1expressionwasreducedby8.8%and25.8%after7daysexposureinthisresearch.Conclusion:LeadacetateproduceneurotoxicitybychangingtheAPPandDNMT1genesmRNAexpression,itsmechanismsmayaltertheGlobalDNAmethylationleveltoincreasetheriskfromPbexposurethatmaypromotesthepathogenesisofAD.keywords:lead;SH—SY5Ycells;geneexpression;methylation本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日前言铅是环境中普遍存在的有毒重金属，可造成人体多种组织和器官的损害，低剂量接触就可引起各种亚临床改变。铅可破坏脑毛细血管内皮细胞形成的血脑屏障，与中枢神经系统病变密切相关，故尤其对神经系统的损害最为严重，主要是学习记忆功能的损害，例如阿尔茨海默氏病(Alzheimersdisease，AD)，即所谓的老年痴呆症[1]。近年来，国内外学者对于铅的神经毒性进行了许多研究，取得了一些进展。已经有大量的证据表明，神经系统在发育过程中对铅的毒性作用更为敏感。流行病学研究表明,长期暴露于低剂量的铅中，会对儿童智力产生不利的影响[2]。例如认知障碍和行为缺陷[3]。还有一些证据表明，暴露于铅中会增加AD的发病风险。根据流行病学调查表明，低剂量的铅暴露是散发性老年痴呆(SporadicAlzheimerdisease,SAD)的发生的危险因素之一[4]。铅在大脑中可促使大脑萎缩和神经原纤维变性，在铅暴露的动物和人群中，可以观察到老年痴呆病人所特有的神经原纤维缠结和老年斑（Se