透明质酸和共轭聚合物在荧光生物传感中应用-application of hyaluronic acid and conjugate polymer in fluorescence biosensing.docxVIP

摘要共轭聚合物材料因为其电子能够在整个共轭链上迁移，可以作为很好的导电高分子材料。通过在共轭高分子的侧链修饰亲水性的基团，可以得到水溶性好的共轭高分子。近年来，水溶性共轭高分子显示出的独特光电性质在OLED，有机太阳能电池，有机存储材料，场效应晶体管和化学生物传感器中获得了广泛的应用。在化学生物传感领域，由于水溶性共轭聚合物可溶于水，环境友好，通过静电作用，聚合物与带相反电荷猝灭剂之间的电子或能量转移可实现对肿瘤标志物或者周围环境中微量物质的检测。透明质酸生物相容性好，易于化学修饰，并且通过CD44受体介导可以靶向肿瘤细胞，实现疾病的诊断与治疗功效。本论文同时利用了水溶性共轭聚合物与透明质酸的特点，将透明质酸修饰荧光分子，或者连接药物分子，在荧光生物传感方面进行了新的研究探索。本论文主要研究工作包括以下几个方面：1．建立了一种基于阳离子型共轭聚合物与荧光素修饰的透明质酸探针用于检测CD44的新方法。阳离子型共轭聚合物通过静电吸引与荧光素修饰的带负电荷的透明质酸结合，并发生荧光共振能量转移；当加入CD44时，它可以与透明质酸发生特异性结合，使阳离子型共轭聚合物与带荧光素基团的透明质酸的结合量减少或距离增大，能量转移效率降低。实验结果表明，能量转移效率下降的程度与CD44的浓度相关。该方法操作省时，价格低廉，响应速度快，CD44的检测限可达2.3310-8g/mL，并且该方法可以扩展至与HA能够特异性结合的其他物质的检测。另外，考察了不同分子量的透明质酸对实验结果的影响。本文还用了TEM，DLS，ZetaPotential等实验手段探索了其作用机理，并将该探针应用到细胞成像上。2．在透明质酸上挂接抗肿瘤药物阿霉素，阳离子型共轭聚合物通过静电吸引与挂接阿霉素的带负电荷的透明质酸结合形成复合纳米粒子，发生电子转移，聚合物荧光被猝灭。肿瘤细胞的透明质酸酶表达升高，它能降解透明质酸，释放阿霉素，使聚合物荧光恢复，因此可以检测透明质酸酶。由于透明质酸靶向细胞膜上的CD44分子，该纳米材料还可用于靶向治疗。关键词：水溶性共轭聚合物，透明质酸，CD44,阿霉素，荧光传感-I-ABSTRACTInrecentyears,theuniqueoptoelectronicpropertiesofwatersolubleconjugatedpolymerhaveshownextensiveapplicationsinOLED,organicsolarcells,organicstoragematerials,fieldeffecttransistorandchemicalandbiologicalsensors.Inthefieldofchemicalandbiologicalsensing,water-solubleconjugatedpolymersareenvironment-friendlyduetotheirwatersolubility.Throughelectrostaticinteractionsbetweenthepolymerandquencherswithoppositecharges,tumormarkerscanrecognized,ortracesubstancesinthesurroundingenvironmentcanbedetectedbyelectronorenergytransfer.Hyaluronicacid,asagoodbiologicalcompatiblesubstance,iseasytobechemicallymodified,andtargettumorcellsmediatedbyreceptorsCD44,andthusrealizediseasediagnosisandtreatment.Inthispaper,takingadvantageofthewater-solubleconjugatedpolymersandthecharacteristicsofhyaluronicacidatthesametime,wemodifiedthehyaluronicacidwithfluorescentmolecule,orconjugateditwithdrugmolecules,andconductedsomenovelstudiesinfluorescentsensor.Themainresearchworkincludesthefollowingaspects:WeestablishedanewmethodtodetectCD44usingaprobebasedoncationicconjugatedpolymers/fluoresceinmodifiedhyaluronicacid.Cat