Plk1Ki67和Survivin在肝癌中表达及相关性研究.docVIP

Plk1Ki67和Survivin在肝癌中表达及相关性研究 　　【摘要】 目的 探讨Plk1、Ki67和Survivin在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组织化学SP法检测60例肝癌组织和20例正常肝组织、肝硬化组织、癌旁组织中Plk1、Ki67和Survivin的表达水平。 结果 60例肝癌组织中Plk1、Ki67和Survivin的阳性表达率分别为83.3% （50/60）、76.7%（46/60）、78.3%（47/60）， 20例正常肝组织、癌旁组织、肝硬化组织中均未见表达。Plk1、Ki67、Survivin 在 HCC 中的表达均与包膜侵犯、癌栓形成及肿瘤转移有关（P0.05）， 而与年龄、性别无关。Plk1与Ki67、Survivin与Ki67、Plk1与Survivin的表达相关（P0.05）。 结论 plk1、Ki67、Survivin三者联合检测可为肝癌的诊断和治疗提供新的依据。 　　【关键词】 肝细胞癌； plk1；Ki67；Survivin；免疫组织化学 　　肝细胞癌组织中Plk1、Ki-67和Survivin的表达及相关性的研究， Polo-Like 激酶 1（ Plk1） 是一种参与调控有丝分裂并与细胞增殖密切相关的重要因子。Plk1 在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。细胞核增殖抗原（ Ki67） 、凋亡抑制蛋白（ Survivin） 的异常表达也与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关， 本研究采用免疫组织化学SP法检测Plk1与Ki67、Survivin在原发性肝细胞癌（HCC）和正常肝组织、癌旁组织、肝硬化组织中的表达，探讨Plk1与Ki67、Survivin的表达与病理参数之间的关系及三者表达之间的相关性， 并为肝癌的靶向治疗、预后判断提供实验依据。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料：收集湖南中医药高等专科学校附属医院2001年1月至今手术切除经病理证实的肝癌组织60例， 其中男37例， 女23例， 年龄23～70岁， 平均（46.43±11.78）岁， 所有患者术前均未行化疗、放疗或免疫治疗。全部病例均有完整的临床病理资料。 　　1. 2 试剂与方法 　　常规S-P免疫组化试剂盒、二硝基联苯胺（DAB）显色液及鼠抗人Plk1、Ki67和 Survivin抗原等。每例均行 SP法染色， 取已知阳性肝癌标本作阳性对照， 以0.01 mol/L PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。 　　1. 3 结果判断 　　Plk1染色以在细胞质着棕色颗粒为阳性。本实验采用传统的人工计数方法。免疫组织化学结果根据染色细胞阳性数和染色强度乘积评分。阳性细胞数：连续5个高倍视野， 细胞阴性为0.l%～25%为1， 26%～50%为2， 50%～75%为3， ≥75%为4；染色强度：无色为0， 淡黄为l， 棕黄为2， 棕褐色为3。细胞阳性数和染色强度两者乘积≥3为（+）， 两者乘积≥6为（++）。所有乘积≥3的结果视为阳性。 　　Survivin 和 Ki67 以细胞浆和细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性。参照 Parenti 等[1]的标准， 每张切片均随机观察 5 个具有代表性的高倍视野， 着色细胞占计数细胞百分率50 %为（+++）。 　　1. 4 统计学方法 　　采用SPSSl5.0 统计软件包进行分析， 采用χ2检验、 spearman等级相关分析， （P0.05）为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 Plk1、Ki67和Survivin的表达特点及其与HCC临床病理参数的关系见表1。 　　2. 2 Plk1、Ki67和Survivin表达的相关性 相关分析显示： 　　HCC 组织中 Ki67 与 Survivin 表达呈正相关（ r =0.566， P 0.05）；HCC组织中Ki67与Plk1表达呈正相关（r=0.570， P0.05）；HCC组织中， Plk1与Survivin表达呈正相关（r=0.631， P0.05）。 　　3 讨论 　　Plk1是一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶。Plk1在细胞有丝分裂的不同时期都起到十分重要的作用。 在分裂活跃的组织器官或肿瘤细胞中Plk1 活性较高[2，3]。研究结果显示， 肿瘤组Plk1阳性率明显高于正常肝组织组、癌旁组织组和肝硬化组织组， Plk1的阳性表达与癌栓形成、包膜侵犯、肿瘤转移等不良预后因素呈明显相关。这三个病理参数代表肝癌侵袭和转移程度和时效， 研究结果说明Plk1阳性表达可能与肝癌的侵袭和转移相关， 所以Plk1与肿瘤的密切关系可能有助于Plk1成为新的肿瘤生物学行为判断指标。 兰斌等[4]认为Plk1 的表达状态与患者的预后有关， 高表达者预后差。 这也许能为我