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一氧化氮与红细胞的相互作用 　　摘要： 一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种新型的具有很强生物学活性的细胞信使分子，其主要生物学效应为血管舒张。血管内皮细胞产生的NO能透过红细胞膜作用于血红蛋白。红细胞变形性主要决定于细胞比容，细胞几何形状及细胞膜的粘弹性。据报道，库血红细胞变形性及NO含量均下降。NO与红细胞血红蛋白（Hb）的相互作用可能影响红细胞膜骨架结构，从而影响红细胞变形性。研究显示NO对红细胞变形性具有浓度依赖性的调节作用。 　　关键词：血液流变学；红细胞变形性；一氧化氮 　　一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种自由基（NO?）性质的气体分子。它性质活泼，难溶于水，易溶于脂肪，极易透过细胞膜而扩散进入靶细胞，与其他物质基团快速结合而发生化学反应。有些反应可使NO性质稳定，另一些反应（如氧气、超氧阴离子）可使NO快速灭活，形成其他自由基，如过氧亚硝基阴离子（ONOO-）[1]。红细胞是血液的主要有形成分，被证明持续含有NO及其代谢产物。NO及其代谢产物的相对浓度和它们精确的化学性质都能影响细胞的氧化还原状态[2]。血管内皮细胞产生的部分NO能够弥散穿过红细胞膜，并与氧合血红蛋白结合形成硝酸盐和高铁血红蛋白，或与血红素形成亚硝酰血红蛋白，或与血红蛋白（Hb）中保守的β93Cys残基（Hbβ93Cys）形成S-亚硝基血红蛋白（SNO-Hb）[3～5]。 　　1 NO的生物学作用及其合成 　　1.1 NO的血管舒张作用 近十多年来的研究[6，7]已经明确了NO的三大作用：内皮细胞依赖性血管舒张作用、神经递质作用和细胞介导的免疫反应。Ignarro[6]认为：NO在人体四个重要生理过程（血管紧张度调节、凝血过程、炎症反应和氧化作用）中都能提高积极作用，消除消极作用；在NO的诸多作用中，又以血管舒张作用最为重要，NO可舒张和扩张血管以确保心脏的足够血供。NO的氧化损伤[8，9]值得关注：NO作用于铁蛋白，影响细胞呼吸及能量代谢；参与过氧化脂质的形成，加速过氧亚硝基阴离子（ONOO-）及羟自由基（OH?）等氧化剂的生成，OH?是介导细胞损伤的重要途径；ON-则可迅速使细胞膜脂质过氧化，并进一步抑制上皮细胞的离子通道，引起细胞损害。 　　1.2 NO的生物合成 据报道[3～5]，生物体内的血管内皮细胞、神经细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、肝细胞等多种细胞均可合成NO，其中又以血管内皮细胞最为重要。NO产生于L-精氨酸末端，反应需要一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）的催化，反应式为：L-精氨酸+NADPH（还原型辅酶Ⅱ）+O2→瓜氨酸+NO+NADP+（辅酶）。红细胞能够表达诱导型一氧化氮合酶（NOS2或iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（NOS3或eNOS），因此有能力合成NO[10]。所以，体内红细胞具备两种来源的NO[10]：一种是血管内皮细胞合成并弥散到血流中的；一种是红细胞本身合成的。 　　2 一氧化氮与红细胞的相互作用 　　Kang[11]等认为正常人的红细胞能表达iNOS和eNOS，但是它们不具备催化活性，但是研究结果证明iNOS可能影响红细胞变形性的维持。Petrov等[10，14]认为红细胞上存在鸟氨酸环化酶，提示NO的合成可能调节红细胞的生理学活性，而细胞外和细胞内的一氧化氮都能对细胞起作用。近年来的研究[10，12，13]都表明NO能够影响红细胞变形性，而且在某个临界浓度，起到了维护细胞力学性状的作用。因此NO被称为正常红细胞变形性的调节器。Bor Kucukatay M等[10]将红细胞分别和NO合酶抑制剂、NO供体（SNP、DETA-NONOate）、NO前体（L-精氨酸）、可溶性鸟氨酸环化酶抑制剂及一种钾通道阻滞剂（TEA）一起孵育1小时后，测定不同切应力下的红细胞变形性。超过阈浓度的NO合酶抑制剂显著的降低红细胞变形性，而最佳浓度的NO供体能够增加红细胞变形性。NO供体以及NO前体L-精氨酸和钾通道阻滞剂能够逆转NO合酶抑制剂的作用。同样，鸟氨酸环化酶抑制作用能够降低红细胞变形性，而NO供体（SNP，DETA-NONOate）能够逆转这种效应。这些结果表明NO对红细胞变形性具有调控作用。 　　被一氧化氮合酶抑制剂损伤的红细胞变形性能够被两种不同化学结构的NO供体所恢复，排除了NO供体本身的影响，同时发现NO对红细胞变形性有双相性影响。红细胞变形性在给予的某个浓度时达到最大化，取决于特异性一氧化氮共体所释放的NO浓度；高于这个浓度，变形性受损。因此，NO的临界浓度对于正常红细胞变形性的维持作用具有决定性意义，高于临界浓度就会降低红细胞变形性[13，14]。这种双相性作用的原因暂时还不能确定，可能跟高浓度NO或它的代谢物诱导的病理生理学作用有