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培养基对果蝇幼虫生长发育影响 　　【摘要】为了筛选出最适果蝇幼虫生长的培养基，以黑腹果蝇为试验对象，比较了4种不同培养基对果蝇发育周期、三龄幼虫的重量和数量等指标的影响。实验结果表明配方A培养基所培养的果蝇三龄幼虫个体数量较多，体型肥大，发育周期较短。 　　【关键词】培养基；果蝇；生长发育； 　　果蝇( Drosophlia ) 作为一种良好的动物实验材料，具有生长迅速、繁殖力强、后代数量大、个体小、饲养管理方便和变异类型多等优点。果蝇唾液腺染色体是典型的巨大染色体，由于其本身巨大型及结构特征，是遗传学研究染色体变异、基因表达比较好的实验材料。培养出适合实验的三龄幼虫是制备出好的染色体标本的关键所在，而培养基是影响三龄幼虫培养效果的主要因素之一。本文通过研究四种配方的培养基对果蝇幼虫生长发育的影响，为培养三龄幼虫合适的饲养条件提供参考。 　　一、材料和方法 　　（一）实验动物及饲养 　　配制4种培养基，按表1-1 中的比例称取各种成分。将红糖、琼脂、玉米粉和麸皮（配方B中不加）倒入烧杯中, 加适量水搅拌，微波炉加热煮沸, 待培养基稍冷却后加入干酵母，搅拌均匀，最后加入丙酸，调匀倒入果蝇培养瓶中。 　　选择黑腹果蝇野生型，体大健壮者作为实验动物，每组取5对，接种于3种培养基中，每种培养基做三个重复，放于20℃恒温培养箱内进行培养，交配2天后将成蝇移除，避免由于幼虫密度大而导致三龄幼虫个体太小，影响实验效果。一龄幼虫出现后，每天在培养基表面滴加4%的酵母液，二龄幼虫出现后每天在培养基表面滴加10%的酵母液。 　　表1-1 培养基配方 　　 　　（二）试验仪器及用具 　　微波炉、电子分析天平、恒温培养箱、烧杯、麻醉瓶、玻璃棒、毛笔、吸水纸、放大镜、培养瓶、棉塞等。 　　（三）检测指标 　　1.果蝇的发育 　　观察记录从成蝇交配到出现一龄幼虫的时间，一龄幼虫到三龄幼虫的时间，三龄幼虫到蛹的时间。 　　2.果蝇三龄幼虫的数量 　　接种后8天，计算果蝇瓶中三龄幼虫的数量，取三个重复的平均值。 　　3.果蝇三龄幼虫的重量 　　接种后8天，在同一处理的三个培养瓶内随机取10只三龄幼虫称重，计算平均体重。 　　（四）统计分析 　　试验所得数据用SPSS20.0统计分析软件进行方差分析，用Duncan’s进行多重比较，结果均以“平均值±标准差”表示。 　　二、实验结果 　　从交配到出现幼虫的时间，4个配方培养基之间没有差异，均为2天。 　　一龄幼虫到三龄幼虫的发育时间：配方A中饲养的一龄幼虫到三龄幼虫的发育时间，显著低于其它三种配方（p＜0.05），而配方B中饲养的一龄幼虫到三龄幼虫的发育时间显著高于其它三种配方（p＜0.05），配方C和配方D饲养的一龄幼虫到三龄幼虫的发育时间差异不显著（p＞0.05）。 　　三龄幼虫到蛹的发育时间：配方A中饲养的三龄幼虫到蛹的发育时间，显著低于其它三种配方（p＜0.05），配方B、配方C 和配方D之间差异不显著（p＞0.05）。 　　三龄幼虫的数量：配方A中饲养的三龄幼虫的数量显著高于其它三种配方（p＞0.05），而配方B中饲养的三龄幼虫数量显著低于其它三种配方（p＞0.05），配方C和配方D饲养的三龄幼虫的数量两者之间差异不显著（p＞0.05）。 　　三龄幼虫的重量：配方A中饲养的三龄幼虫的重量显著高于其它三种配方（p＞0.05），而配方B中饲养的三龄幼虫数量显著低于其它三种配方（p＞0.05），配方C和配方D饲养的三龄幼虫的数量两者之间差异不显著（p＞0.05）。 　　表2-1 不同培养基对果蝇发育的影响 　　 　　三、讨论 　　配方B为实验室中常常采用的果蝇培养基，其培养效果要差于另外三种培养基。 　　配方C与配方B相比多添加了麸皮，配方C在发育时间上，三龄幼虫的重量和数量上均优于配方B，本实验结果与陈宗礼的研究结果相似。可能的原因是加入麸皮的培养基比较疏松，透气性好，可提供充足的氧气，利于酵母菌的生长繁殖，从而为果蝇生长发育提供了丰富的食物来源。另一方面，加入麸皮的培养基松软度比较适宜，活酵母发酵会产生气泡，可使培养基变得疏松，利于果蝇幼虫钻洞取食，从而促进果蝇幼虫的生长发育。 　　配方D与配方C相比多添加了酵母粉，酵母粉是果蝇饲料中不可缺少的成分, 研究表明增加酵母粉摄入量可使雌果蝇的产卵数增多。也可促进果蝇精子发生各阶段细胞数量的增加，与不添加酵母粉组相比, 含酵母粉组果蝇产卵数量和生育期都具有明显优势, 且产卵高峰明显提前, 持续时间延长, 虫卵发育成蛹的天数也大大缩短。本研究结果表明，配方D在发育时间上，三龄幼虫的重量和数量与配方C之间均无显著性差异，可见多添加的酵母并没有对果蝇的发育起到促进作用，推测可能的原因是两配方酵母的浓度