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TRAIL联合长春瑞滨协同诱导人肺癌细胞凋亡及相关机制的实验研究-肿瘤学专业论文
学位论文原创性声明刷版权使用授权书
学位论文 创性声明
本人郑lIt卢嘀 g 所垒交的学位论文,11;.本人在导师的指导下,徨主iJ.I.行研究 工作所取得的真实成果.除文中已注明引 m(J 内容外.本论文不合任何 Jt他个人
集体已经t:.k且是lIe写过的作品成巢.对本论文的研究做出重要贡献的个人犯集
体,均已在文中以明确方式标明 本人先全意识到本声明的法律结果由本人1#归.
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2
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目 录
中英文缩略词表 1
中文摘要 2
英文摘要 4
引言 6
材料和方法 9
结果 21
讨论 27
结论 31
参考文献 32
致谢 35
综述 36
福建
福建医科大学 2010 级硕士研究生毕业论文
1
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中英文缩略词表
英文缩写 英文全称 中文
Caspase Cysteinyl aspartate specific protein 半胱氨酸天冬氨酸
特异性蛋白酶
DR4 Death receptor4 死亡受体 4
DR5 Death receptor5 死亡受体 5
DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FITC Fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 IC50 Half inhibitory concentration 半数抑制浓度 MTT Thiazolyl blue tetrazolium brom- ide 噻唑兰 NSCLC Non-Small Cell Lung Cancer 非小细胞肺癌 OD Optical density 光密度
PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液
PI Propidium iodide 碘化丙啶
PS Phosphatidylserine 磷脂酰丝氨酸
TRAIL Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand
肿瘤坏死因子相关凋亡诱
导配体
2
2
TRAIL 联合长春瑞滨协同诱导人肺癌细胞凋亡及相关机制
的实验研究 中文摘要
目的:
观察 TRAIL、长春瑞滨及联合用药对人肺腺癌 A549 细胞增殖及凋亡的影响, 并初步探讨其可能的作用机制。
方法:
1.检测 TRAIL、长春瑞滨对人肺腺癌细胞株体外增殖的影响:采用 MTT 法检测不同浓度的 TRAIL、长春瑞滨干预 A549 细胞 24、48h 后,各组细胞的增 殖情况,并计算药物半数抑制浓度(IC50)。
2.检测各组药物对人肺腺癌细胞株凋亡的影响:取对数生长期肺癌 A549 细胞,分为对照组、TRAIL 组、长春瑞滨组、TRAIL+长春瑞滨组。相应组别药 物分别干预 A549 细胞 48h,动态观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪技术检 测药物干预 A549 细胞 48h 后,各组细胞凋亡率的变化。
3.检测各组药物干预后人肺腺癌细胞株死亡受体及凋亡相关蛋白的表达情 况:采用 Western blot 技术检测各组药物干预 A549 细胞 48h 后,死亡受体 DR4、 DR5 及细胞凋亡相关蛋白 caspase-3 表达的变化。
结果:
1.MTT 结果显示:TRAIL 在体外对 A549 细胞的增殖具有抑制作用,其抑 制作用与药物浓度之间呈剂量效应正相关,24、48h 的 IC50 分别为 254.70μg/ml、 101.98μg/ml;长春瑞滨在体外对 A549 细胞的增殖具有较强的抑制作用,抑制 作用与药物浓度之间呈剂量效应正相关,24、48h 的 IC50 分别为 25.12μg/ml、 8.71μg/ml。TRAIL 与长春瑞滨两药联合干预对 A549 细胞的生长抑制作用与单 药组比较明显增强,差异有统计学意义(P0.05),两药相
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