usp22在肾癌中的表达及临床意义-外科学(泌尿外科学)专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 目录 HYPERLINK \l _bookmark0 中文摘要 1 HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract 3 HYPERLINK \l _bookmark2 前言 5 HYPERLINK \l _bookmark3 1.1 USP22 的发现及其分子结构 5 HYPERLINK \l _bookmark4 1.2 USP22 参与的基因转导及其调节 6 HYPERLINK \l _bookmark5 1.3. USP22 与人类肿瘤 7 HYPERLINK \l _bookmark6 1.4 USP22 与泌尿系统肿瘤 9 HYPERLINK \l _bookmark7 1.5 肾肿瘤的病因 9 HYPERLINK \l _bookmark8 1.6 本论文的思路、目的和意义 10 HYPERLINK \l _bookmark9 材料与方法 12 HYPERLINK \l _bookmark10 2.1 主要仪器 12 HYPERLINK \l _bookmark11 2.2 生物材料 12 HYPERLINK \l _bookmark12 2.3 主要试剂来源 12 HYPERLINK \l _bookmark13 2.4 主要试剂配制 13 HYPERLINK \l _bookmark14 2.5 实验方法 15 HYPERLINK \l _bookmark15 2.6 统计学方法 24 HYPERLINK \l _bookmark16 实验结果 25 HYPERLINK \l _bookmark17 3.1 总 RNA 的提取，逆转录及 RT-PCR 实验结果 25 HYPERLINK \l _bookmark18 3.2 免疫组织化学实验结果 30 HYPERLINK \l _bookmark19 3.3 免疫印迹（western blotting）实验结果 36 HYPERLINK \l _bookmark20 讨论40 HYPERLINK \l _bookmark21 结论44 HYPERLINK \l _bookmark22 参考文献45 HYPERLINK \l _bookmark76 文献综述49 HYPERLINK \l _bookmark77 致谢58 PAGE PAGE 10 中文摘要 usp22 在肾癌中的表达及临床意义 研究生：黎云 导师：刘荣福教授 目的 研究泛素特异肽酶 22(ubiquitin specific peptidase 22)在肾肿瘤发生时其在肿 瘤组织及对应癌旁组织（距离肾肿瘤≧2CM）中的表达情况，并分析癌组织和癌 旁组织中 USP22 的表达差异情况，结合临床病理资料，探讨其可能存在的因果关 系，进而得出相关性意义。 方法 分析收集自 2012 年 7 月至 2013 年 12 月厦门大学附属第一医院泌尿外科肾 癌根治手术切除的肿瘤标本 59 例，手术后病理回报确认恶性程度、淋巴结转移情 况以及病理分级等病理临床数据。癌旁组织以及对应的癌组织各 59 例，其中癌旁 组织取材于癌组织远端（≧2CM）的癌旁肾组织，而癌组织则取材于未发生坏死 的癌组织部分，癌组织是肉眼明显可分辨的，其中男性患者 40 人，女性患者 19 人，年龄约在 30-91 岁之间，平均 58.2 岁，而癌旁组织则是远离肿瘤的切缘。患 者在接受肾癌根治手术前均未接受任何放疗或者化疗。在 59 例肾肿瘤标本中，肾 透明细胞癌占主要。用 Trizol 抽提其中 20 例患者癌组织及相应癌旁组织总 RNA， 经逆转录及合成特异性引物行实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测不同病例 USP22 的基因表达；通过免疫组织化学（二步法）法检测 59 例病例标本的 USP22 蛋白表达细胞定位以及蛋白表达量情况；蛋白裂解液裂解其中 20 例患者对应癌组 织及癌旁组织蛋白，进行蛋白免疫印迹（Western Blotting）检测，观察不同病例标 本的数据差异并与临床资料相结合，进行相关分析，对比分析癌组织与癌旁组织 USP22 表达水平的差异。 结果 在59 例肾肿瘤标本中，肾透明细胞癌占 51 例（86.4%），乳头状细胞癌占 3 例（5.1%），嫌色细胞癌 1 例（1.7%），梭形细胞癌 1 例（1.7%），肾上皮样血管平 滑肌脂肪瘤 1 例（1.7%），嗜酸细胞腺瘤 2 例（3.4%）。经检测，在 59 例肿瘤标本 中，免疫组化结果显示，癌旁组织组的阳性表达率高达 93.2%，蛋白主要定位于胞 质。癌组织的蛋白表达阳性率为 47.5%，且表达强度较癌旁组织