TRPM7对内质网应激诱导类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的调控作用研究-中药学专业论文.docxVIP

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 李小枫 2014 英 文 缩 略 词 Abbreviation 英文缩写 英文全称 中文全称 A Absorbance 吸光度 AA Adjuvant arthritis 佐剂性关节炎 AP Ammonium persulfate 过硫酸铵 Bp Base pair 碱基对 cDNA Complementary DNA 反转录 DNA CFA Complete freund’s adjuvant 弗氏完全佐剂 CHOP C/EBP homologous protein C/EBP 同源蛋白质 DMEM Duibecco’s modified Eagle’s medium Dulbec 改良的 Eagle 培养液 DEPC Diethyl pyrocarbonate 焦碳酸乙二脂 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EB Ethidium bromide 溴化乙啶 ER endoplasmic reticulum 内质网 FCS Fetal calf serum 胎牛血清 FLS Fibroblast-like synoviocytes 成纤维样滑膜细胞 H Hour 小时 Min Minute 分 mRNA messenger ribnucleic acid HYPERLINK /view/28832.htm 信使核糖核酸 MTT 3-[4,5-dimethylthiazol]-2,5-diphen-yltetrazolium bromide 噻唑蓝 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PF Pulmonary fibrosis 肺纤维化 PMSF Phenylmethyl sulfonylfluoride 苯甲磺酞氟 PVDF Polyvinylidene Fluoride 硝酸纤维素膜 RA Rheumatoid arthritis 类风湿性关节炎 rpm Revolution per minute 转/分 RT-PCR Reverse transcription RT-PCR 逆转录-聚合酶链 式反应 Sec Second 秒 SDS Sodium dodecyl sufate 十二烷基磺酸钠 siRNA small interfering RNA 小干扰 RNA TBS Tris buffered saline Tris 缓冲盐溶液 TEMED N”N”N”N-Tetramethylethylenediamine 四甲基乙二胺 TG Thapsigargin 毒胡萝卜素 TRPM7 Transient receptor potential melastain 7 瞬时受体 电位通 道 7 PAGE PAGE 10 TRPM7 对内质网应激诱导类风湿性关节炎成纤维 样滑膜细胞凋亡的调控机制研究 研究生：李小枫 导师：李俊 (安徽医科大学药学院，合肥，230032) 中文摘要 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种不明病因的慢性自身免 疫性临床综合征，主要表现为慢性、全身性、侵蚀性外周关节滑膜组织。成 纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)是滑膜组织的主要细胞，并 与 RA 发病过程有着密切关系。如何抑制 FLS 增殖或促进凋亡是研究 RA 的 热点。 文献报道，RA 发病过程中伴随着 ERS 的参与。当细胞遭到毒性药物、 感染、缺氧等刺激时，使内质网功能紊乱，产生内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)，引起内质网腔未折叠蛋白增多和细胞内钙离子超载， 激活 Caspase-3，导致细胞凋亡，但是 ERS 是否引起 FLS 凋亡还未见报道。 有研究发现 ERS 的发生伴随着细胞膜离子通道的改变，RA 中 ERS 发挥功能 是否与细胞膜离子通道蛋白有关，尚未见报道。 瞬时受体电位通道 7(transient receptor potential melastain 7, TRPM7)是一 种具有阳离子通道和蛋白激酶双重结构的双功能膜蛋白，可使自身或底物磷 酸化，也被称为“通道酶”。TRPM7 广泛存在于机体组织中，通过调控细胞内 阳离子浓度参与细胞的生长、增殖、迁移、凋亡等多种生理病理过程。但其 在 RA 发病过程中的作用并未被阐明。 本研究选择佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)模型，因 AA 病理特征与 RA 相似，所以 AA 模型作为动物研究对象，FLS 作为细胞研究对象，观察 TRPM7 对 ERS 诱导 FLS 凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。主要研究 内容概括如