干旱胁迫下外源甜菜碱对石榴光合作用渗透调节及保护酶活性影响.docVIP

干旱胁迫下外源甜菜碱对石榴光合作用渗透调节及保护酶活性影响 　　摘要：选用2年生泰山红石榴为试验材料，用200 mmol/L浓度甜菜碱叶面喷施，研究干旱胁迫下喷施甜菜碱对石榴光合作用、渗透调节及抗氧化酶响应的影响。结果表明，干旱胁迫下，喷施甜菜碱提高了石榴叶片可溶性糖、游离脯氨酸含量，同时提高苹果幼树渗透调节能力；提高了超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）抗氧化酶活性，降低了丙二醛（MDA）、H2O2积累，缓解了干旱胁迫对细胞结构的伤害；同时，提高叶片相对含水量、叶绿素含量，使叶片光合能力增强。甜菜碱提高苹果幼树抗旱性的主要作用机制，是对渗透调节物质代谢的调节及对抗氧化酶等生物大分子物质结构的保护。 　　关键词：外源甜菜碱；干旱；石榴；光合作用；渗透调节；保护酶 　　中图分类号： S665.401 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）11-0229-04 　　近年来，河南省降水量呈减少趋势，年降水分布不均匀，干旱对果树生产影响越来越严重[1]。干旱胁迫打破叶片水分平衡，造成水分代谢碳代谢失衡，影响植物一系列代谢活动[2]，相关研究表明，干旱胁迫导致气孔导度（Gs）降低，净光合速率（Pn）下降[3]。长时间的干旱胁迫导致保护酶失活， O-2?、丙二醛（MDA）等积累，损伤细胞结构，发生光破坏[4-6]。 　　长期的进化使植物形成一整套的生理生化机制帮助其抵御不良的外界环境。其中，渗透调节、抗氧化酶是植物抵抗干旱环境的重要手段[7]。相关研究表明，抗旱能力较强的品种拥有较高的渗透调节能力及抗氧化酶活性， O-2? 、H2O2等有害物质积累较少，同时光合能力较高[8-10]。据报道，施用某些外源物质是增强植物抗旱能力的有效手段，如施用钙、壳聚糖、硅等[11-13]。甜菜碱是一种季铵类化合物，是重要的细胞相溶性物质，干旱胁迫下在许多植物细胞内大量积累，其生理功能主要是参与细胞渗透调节，参与稳定生物大分子的结构与功能，影响离子在细胞内的分布和吸收等[14]。施用甜菜碱能够有效提高作物抗旱性，相关研究在小麦、玉米、烟草等上有较多的报道[15-17]。 　　石榴是果树开发的重要树种，目前关于石榴的研究主要集中在育种、果实组分及果色形成机制等方面，对于抗逆性的研究较少，尤其关于甜菜碱调节石榴抗旱性方面研究更是鲜见报道[18-19]。本研究以2年生石榴幼树为试验材料，研究干旱胁迫下施用外源甜菜碱，石榴幼树光合作用、渗透调节、酶促调节复合响应，以期为提高石榴抗旱能力提供技术支持。 　　1 材料与方法[LL] 　　1.1 材料 　　试验材料为泰山红石榴（Punica granatum L. ‘Taishanhong’），长势一致，2年生，取自河南省河阴石榴基地。2014年3月中旬栽植于盆口直径40 cm、高35 cm的塑料花盆中，挖20 cm土穴，将盆埋入，防止高温对根系的影响。基质配比为园土 ∶有机肥 ∶细沙=3 ∶1 ∶1，每盆基质15 kg，田间持水量21.5%，有机质含量14.3 g/kg，全氮含量2.2 g/kg，速效磷含量 39.8 mg/kg，速效钾含量118.4 mg/kg。置于避雨棚内，每株树留取相同枝量（5根枝条），自然条件下生长。 　　1.2 试验设计 　　2015年5月下旬进行试验处理，选取20株于傍晚浇透水后停止浇水，进行干旱处理，第2天（土壤相对含水量85%～75%）进行第1次采样，用烘干称质量法测土壤相对含水量，并进行光合测定，此后每隔1 d用烘干称质量法测量土壤相对含水量，在土壤相对含水量达到60%～50%、45%～35%、30%～20%时进行取样并进行光合测定。试验设2个处理：（1）处理组，选取待干旱处理的10株树，干旱处理前叶面喷施200 mmol/L甜菜碱（本研究采用甘氨酸甜菜碱，简称GB经预试验200 mmol/L效果最好），连续喷施5 d，至开始干旱处理结束，08：00、20：00定时2遍喷施；（2）对照（CK），选取待干旱处理的10株树喷施去离子水，喷施方法同处理组。取样时选取枝条中部功能叶片采样。 　　1.3 测定项目与方法 　　1.3.1 光合作用测定 取营养枝，以生长点为起始点选取第6～8节位功能叶，作为待测叶片，重复15次。利用TPS-2光合仪（Hansatech，英国），晴天09：00―11：00测定光合参数，包括光合速率、气孔导度、细胞间隙二氧化碳浓度（Ci）等。 　　1.3.2 叶片相对含水量（RWC）、叶绿素含量（Chl）测定 叶片相对含水量采用称质量法[20]测定；叶绿素含量测定采用95%乙醇浸泡法[21]。 　　1.3.3 保护酶活性测定 超氧化物歧化酶（SOD）活性采用NBT法[22]