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小花棘豆对家兔血清蛋白影响 　　摘要：探讨了小花棘豆对家兔血清蛋白含量的影响，进一步揭示了小花棘豆对家兔的毒性作用机理。结果表明，各试验组家兔的血清总蛋白、α球蛋白含量无明显变化（P0.05）；血清球蛋白、β球蛋白含量均显著高于对照（P005）；血清γ球蛋白含量呈先升高后降低趋势；血清白蛋白含量低于对照（P0.05），试验组家兔血清白蛋白与球蛋白含量的比值（A/G）在试验期间均呈降低的趋势；小花棘豆对试验家兔的肝脏具有损害作用。 　　关键词：小花棘豆；血清蛋白；家兔 　　中图分类号：S859.87文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0164-02 　　收稿日期：2013-05-08 　　基金项目：国家自然科学基金（编号；新疆生产建设兵团博士基金专项（编号：2008JC07）；新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室开放课题（编号：HS201207）。 　　作者简介：王帅（1985―），男，山西长治人，硕士，实验师，主要从事牧草资源开发利用研究。E-mail：wangshuaidky@126.com。 　　通信作者：马春晖，教授，主要从事牧草生产与加工研究。Tel：（0993）2055868；E-mail：chunhuima@126.com。小花棘豆为豆科棘豆属植物，属于疯草类有毒植物，广泛分布于新疆和田、阿克苏等地区，苦马豆素是其主要毒性成分。在牧草缺乏的冬季和初春，当家畜大量采食小花棘豆，就会中毒甚至死亡，这对畜牧业生产造成了严重危害[1]。国内外学者在对甘肃棘豆[2-3]、黄花棘豆[4]、冰川棘豆[5]等疯草的毒性试验研究中，通过非特异性酯酶染色、E-玫瑰花环试验以及血清蛋白电泳试验证实，中毒动物的细胞免疫功能降低；但也有研究表明，在低于中毒剂量的情况下，苦马豆素不仅有抗肿瘤效果，而且能增强机体的免疫功能[6-7]。小花棘豆在新疆南疆地区分布较广，在塔里木河中下游天然草地有分布，盖度最高达95%[1]。目前对家畜小花棘豆中毒方面的研究较多，但未见小花棘豆对动物血清蛋白影响的报道。本研究探讨小花棘豆中毒对家兔细胞免疫功能的影响，以期为全面认识小花棘豆的毒性作用，合理利用小花棘豆资源提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　小花棘豆于2012年8月采集于和田地区策勒县，由塔里木大学动物科学学院草业科学学科组鉴定。取植株地上部分阴干、粉碎，过20目筛后备用。 　　总蛋白和白蛋白试剂盒购自长春汇力生物技术公司；醋酸纤维素薄膜购自浙江黄岩曙光化工厂；其他试剂均为国产分析纯。 　　Carry 100型紫外-可见分光光度计，澳大利亚；BS124型精密电子天平，德国赛多力斯；Direct-Q3型超纯水系统，美国Millipore；DYY-6型电泳仪，北京六一仪器厂；DK-8D型电热恒温水槽，上海精宏实验设备有限公司。 　　1.2试验动物 　　4～5月龄家兔24只，雌雄各半，体重（2.0±0.1） kg，购自塔里木大学动物科学学院实验站。家兔购回后内服左旋咪唑 3 mg/kg 体重驱虫，临床观察2周，确认临床健康后将其随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组，每组6只，分笼饲养。对照组饲喂青干草和少量精料，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别按照5、10、20 g/kg体重的剂量饲喂小花棘豆，待采食完毕后再添加青干草和精料，自由饮水。 　　1.3测定指标 　　试验前后每隔7 d空腹耳缘静脉采血1次，共采血 11次，迅速分离血清，检测血清总蛋白、白蛋白、球蛋白含量，并利用醋酸纤维薄膜电泳法进行血清蛋白电泳分析，计算总蛋白中白蛋白、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白所占百分率及各自含量，计算白蛋白（A）与球蛋白（G）含量的比值（A/G）。 　　1.4数据分析 　　使用SPSS 11.5软件的One-Way ANOVA进行单因素方差分析及Duncans多重比较，检验误差为5%、1%。 　　2结果与分析 　　2.1家兔血清总蛋白、白蛋白、球蛋白含量的变化 　　所有攻毒家兔在试验期内血清总蛋白含量均与对照组差异不显著（P0.05），但攻毒家兔血清白蛋白含量呈下降趋势，球蛋白含量呈上升趋势（图1、图2、图3）。其中试验Ⅱ组、试验Ⅲ组在试验21 d时血清白蛋白含量显著低于对照组（P0.05），试验Ⅰ组在28 d时血清白蛋白含量显著低于对照组（P0.05）。从试验49 d起攻毒家兔血清白蛋白含量趋于稳定。试验Ⅱ组、试验Ⅲ组血清球蛋白含量在 28 d 时显著高于对照组（P0.05），试验Ⅰ组血清白蛋白含量在42 d时显著高于对照组（P0.05）。 　　2.2家兔血清α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白含量的变化 　　试验期内攻毒家兔血清α球蛋白含量与对照组差异不显著（P0