局部44℃温热治疗尖锐湿疣效果及对外周血CD4CD25Foxp3调节性T细胞及相关因子影响.docVIP

局部44℃温热治疗尖锐湿疣效果及对外周血CD4CD25Foxp3调节性T细胞及相关因子影响 　　[摘要] 目的 探讨局部44℃温热治疗尖锐湿疣的效果及对外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞）及相关因子的影响，以研究其在尖锐湿疣发病机制中的作用。 方法 选取2013年1月～2015年4月益阳市中心医院皮肤科门诊就诊的尖锐湿疣患者35例（CA组），正常者35例作为对照组，CA组应用局部44℃温热治疗，3个月后评价疗效并测定治疗前后外周血血清中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和相关因子水平，并与对照组进行比较分析。 结果 CA组患者外周血CD4+CD25+Treg细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比及CD4+CD25+T细胞表面抑制性膜分子CTLA-4、GITR、PD-L表达均明显高于对照组（t = 9.52、15.07、8.63、9.16、10.92，均P 0.05）；胞内IL-10和TGF-β阳性细胞百分比较对照组增多（t = 3.22，7.02，均P 0.05）；CA组治疗3个月，总有效率为85.71%（30/35），治疗中未见明显副作用。外周血CD4+CD25+Treg细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、CTLA-4、GITR、PD-L水平及IL-10、TGF-β阳性细胞百分比均较治疗前显著降低，差异均有统计学意义（t = 7.76、12.91、7.46、7.68、9.29、2.64、6.01，均P 0.05）。 结论 HPV感染可活化增殖CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞，其高表达协同刺激分子和抑制性细胞因子，温热治疗尖锐湿疣安全有效，其治疗机制可能与调节CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞及相关因子有关。 　　[关键词] 44℃温热；尖锐湿疣；调节性T细胞 　　[中图分类号] R752.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）09（b）-0107-04 　　CD4+CD25+调节性T细胞（Treg细胞）对机体发挥免疫调节功能方面起非常重要的作用，如维持免疫自稳、调控免疫应答等。研究表明，由人类乳头瘤病毒（HPV）引起的尖锐湿疣（CA）与其细胞免疫功能相对不足密切相关，CD4+CD25+Treg细胞调控机体对病毒感染的免疫应答主要通过抑制效应细胞的增殖和抑制细胞因子分泌，CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的局部聚集可能是皮损的CA实现免疫逃逸的机制之一[1]。近年来，局部的44℃温热治疗被成功地应用于不同型别的HPV感染，可能通过促进朗格汉斯细胞（LC）的迁移和成熟，在局部细胞免疫应答中发挥作用[2]。本研究通过动态检测35例CA患者在44℃温热治疗前后CD4+CD25+Treg的表达及在调节性T细胞分化发育和功能维持中起重要作用的转录因子Foxp3以及负性协同刺激分子，如程序性死亡分子配体（PD-L）、细胞毒T细胞相关抗原4（CTLA-4）和肿瘤坏死因子受体（GITR）等的表达水平，以及CD4+CD25+Treg细胞内分泌的抑制性细胞因子白介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）的阳性细胞百分比，探讨44℃温热对CA患者机体免疫功能的影响及可能作用机制，为温热治疗尖锐湿疣提供新的理论依据和新的治疗靶点。 　　1 对象与方法 　　1.1 对象 　　选取2013年1月～2015年4月益阳市中心医院皮肤科门诊就诊的经临床确诊的CA患者35例，均无复发性CA病史，35例受试者疣体数目≥5个或单个直径≥2 cm，符合2000年原卫生部防疫司制订的CA诊断标准[3]，其中男15例，女20例；年龄18～60岁，平均（37.45±10.58）岁；病程0.1～30个月，平均（9.63±3.51）个月。选取正常人作为对照组，共35例，其中男17例，女18例，年龄18～58岁，平均（30.78±9.41）岁。所有研究对象近2个月内没有使用过任何免疫调节的相关药物，排除全身衰竭、结核、肝肾疾病、肿瘤、器官移植及其他免疫性疾病。各组间年龄、性别差异无统计学意义（P 0.05），具有可比性。所有标本的收集均经其本人或家属同意并签署知情同意书。 　　1.2 治疗方法 　　应用中国医科大学自主研制的温热治疗仪（专利号ZL200720185403.3），选取靶疣进行局部44℃温热治疗，连续治疗4 d，每次60 min，1 次/d；间隔7～10 d，再连续治疗3 d；间隔7～10 d，再连续治疗2 d；此后每隔7～10 d进行1次治疗，直至疣体消退。3个月时观察临床疗效。 　　1.3 研究方法 　　1.3.1试剂和仪器 CD4-FITC单克隆鼠抗人抗体，CD