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微颗粒在临床疾病中研究进展 　　微颗粒是（Microparticles， MPs）是细胞遇到缺氧、损伤、压力等刺激时产生并释放至细胞外间隙的一种异质性质膜超微结构，直径范围在100～1000 nm。MPs可携带多种信号与其他细胞相互作用，并调节靶细胞的功能[1]，越来越多的研究表明MPs不仅是疾病发生的重要原因，同时也是机体发生病理变化的结果，因此有望成为临床诊断疾病的生物标记或治疗疾病的药物靶点，有着巨大的研究前景。本文就MPs与临床有关的研究进展进行综述。 　　1 MPs与临床疾病 　　1.1 MPs与心血管疾病 目前已知多种细胞来源的MPs都能携带组织因子（Tissue factor， TF）[2]，具有很强的促进凝血的作用。有研究发现单核细胞来源的MPs表达具有功能活性的TF1，这种MPs可在血栓形成的部位不断累积，使凝血进一步恶化[3]。血小板来源的MPs和红细胞来源的MPs可以通过凝血因子XII依赖的内源性途径激发并促进凝血酶产生[4]，血小板来源的MPs还可以外显磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）及其他一些带有负电荷的磷脂，为活化凝血因子提供结合位点，诱导凝血并参与血栓形成[5]。Mibank E等人在动脉粥样硬化小鼠实验中发现，心肌缺血损伤后，其粥样斑块中含有大量巨噬细胞，这些细胞来源的MPs携带肿瘤坏死因子（Tumour Necrosis Factor alpha，TNF-α）使心肌细胞肌节振幅缩短，动力减弱，说明MPs在心肌梗死的炎症信号通路中起推动作用[6]。另一方面，MPs也能通过调节抗凝剂或溶解纤维蛋白发挥抗凝作用，促进活化的抗凝剂C蛋白和S蛋白调节凝血[7]，MPs还有助于纤维蛋白溶解酶的产生，后者促进血凝块的降解[8]。因此，MPs具有促凝和抗凝双方面的作用，任何一方的失衡都会造成病理结果。 　　1.2 MPs与感染及炎症反应 败血症诱导的微血管损伤会导致循环系统中MPs增多，由于MPs在血栓形成、炎症反应及血管生成中所具有的多种作用，因此也极有可能是导致败血症及感染性休克的主要原因之一[9，10]。MPs表面的TF可能是引发败血症的弥散性血管内凝血（disseminated intravascular coagulopathy，DIC）的起始因素，有研究发现内皮细胞来源的MPs在DIC发生早期，其CD105表达增多，CD31表达降低，两者具有显著的直接联系[11]。Zafrani等人的研究发现与普通实验小鼠相比，钙蛋白酶抑制剂的高表达的转基因小鼠，其循环系统中MPs数量明显减少，发生炎症、DIC及器官损伤的几率也大大降低，其存活率增高。但将发生败血症的普通小鼠体内的MPs注入这种转基因小鼠，则会导致后者发生凝血功能紊乱，死亡率增加[12]，说明MPs在败血症发生过程中直接参与钙蛋白酶介导的机体损伤。此外，血小板来源的MPs也能激发产生炎症因子，例如白介素1（Interleukin 1，IL-1）、IL-6、IL-8和TNF-α，这些细胞因子反过来又会进一步激活炎症，使细胞以产生更多的MPs，从而加重炎症反应[13]。 　　1.3 MPs与肿瘤 肿瘤细胞产生的MPs可以携带肿瘤细胞特异性的分子标记，例如内皮细胞粘附分子，人表皮生长因子受体2，趋化因子受体6，细胞外金属蛋白，血管内皮生长因子等[14，15]。研究发现原癌蛋白和趋化因子可以通过肿瘤细胞来源的MPs在细胞之间传递，说明肿瘤细胞的一些侵袭因子可以在肿瘤细胞内部水平移动，使所有肿瘤细胞都具有高度侵袭性[16]；还有研究发现当正常细胞暴露在携带有纤连蛋白和组织型谷氨酰胺转移酶的肿瘤细胞来源的MPs中时，正常细胞也会获得该MPs具有的表型[18]，说明肿瘤细胞来源的MPs可能是导致肿瘤转移的重要原因。 　　除了肿瘤细胞来源的MPs，其他细胞产生的MPs也在肿瘤的发展、转归中起作用。血浆MPs水平增高的前列腺癌患者比MPs正常的患者更容易出现肿瘤转移，其预后也更为不良[19]，然而其中的机制目前还不清楚，并且能够用于指导临床诊断以及对预后具有参考价值的MPs种类很少[20]，研究表明MPs可能比肿瘤细胞携带了更高浓度的特异性miRNAs，这种非基因成分的转移特征也为临床解决肿瘤耐药提供了潜在的治疗方法。 　　2 MPs临床研究面临的困难 　　2.1样本处理与制备 生物体液成分复杂，其MPs的表达也受到多种因素影响。例如提取血液中的MPs，抽取最初的几毫升血样的操作规范化对于获取MPs非常重要。应避免选择肝素这种更易引发溶血的抗凝剂[21]，避免搅拌和长期储存，防止人为造成MPs数量增加。此外，血液粘稠度，比如纤维蛋白原，白蛋白的含量情况，分离过程中使用的离心力等等都会影响最后的MPs分析。而目前各实验室提