甘薯淀粉废水营养成分提取及其免疫活性研究.docVIP

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甘薯淀粉废水营养成分提取及其免疫活性研究

甘薯淀粉废水营养成分提取及其免疫活性研究   摘要 为从甘薯淀粉废水中提取甘薯提取物,并研究其免疫活性,以工厂生产的甘薯淀粉废水为原料,采用硫酸-蒽酮法检测糖含量,紫外分光光度法检测蛋白质含量,按《水质 化学需氧量的测定 重铬酸盐法》(GB 11914―89)测定COD,动物试验检测免疫活性,研究沉淀剂对甘薯营养成分提取率、废水水质的影响。结果表明,本工艺使淀粉浆(废水)体积减小2/3,其 COD由15 047 mg/L下降到2 850 mg/L,减少80%以上;废水中蛋白质的提取率为92.2%,蛋白质浓度由5.01 mg/mL减小到0.52 mg/mL;多糖的提取率为62.6%。动物试验表明提取物增加了小鼠的胸腺/体重、脾脏/体重、廓清指数K和吞噬指数α等,且呈剂量依赖关系,尤其是高剂量组(2.25 g/kg)使动物免疫活性极显著增加(P0.01)。本工艺可以有效提取甘薯淀粉废水中的营养成分,甘薯提取物具有显著提高免疫活性的作用。   关键词 甘薯;淀粉;废水;营养成分;免疫活性   中图分类号 S531 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2017)22-0237-02   甘薯亦称番薯、红薯、白薯、红苕、山芋等。16世纪末甘薯从南洋被引入中国,现为我国第五大粮食作物,也是主要蔬菜之一,在中国各地得到广泛种植,总产量和种植面积均居世界首位。据《本草纲目》记载,甘薯性味甘平无毒,补虚乏、益气力、健脾胃、强肾阴, 使人长寿少病[1]。研究结果表明,甘薯功能成分丰富,具有增强免疫、抗癌、抗突变、降血脂、降血糖、抗氧化、延缓衰老等功能[2]。药用价值和保健价值很高[2]。   我国的甘薯加工主要用于提取甘薯淀粉,而甘薯淀粉加工最突出的问题有2个,一是除甘薯淀粉被利用外,甘薯蛋白和多糖等其他活性成分完全没有被利用,资源浪费严重;二是未被利用的甘薯活性成分随甘薯淀粉废水一起造成了更严重的环境污染。因此,针对甘薯淀粉生产废液的利用开展了大量研究,如先浓缩甘薯淀粉废水,再用乙醇沉淀获得糖蛋白粗品,再多次色谱纯化得到纯品[3]。该技术工艺复杂,成本高,难以在生产上应用。到目前为止,甘薯淀粉废水并未得到开发利用。   本研究针对甘薯淀粉废水污染严重、综合利用率低等问题,改进了甘薯淀粉废水提取工艺,联产分离甘薯提取物,并研究了提取物提高免疫活性的能力,以期为甘薯淀粉废水的开?l利用提供理论基础。   1 材料与方法   1.1 试验材料   1.1.1 原料。供试甘薯品种为渝薯17,由西南大学重庆甘薯工程技术中心提供;甘薯淀粉废水取自重庆壁优特生物技术公司(重庆市忠县黄色镇)生产基地新加工的甘薯淀粉废水,速冻备用。   1.1.2 试验动物。洁净级裸鼠40只,雌、雄各20只,体重为(20±2)g,购自重庆市中药研究院实验动物研究中心。   1.2 试验方法   1.2.1 甘薯淀粉废水处理及提取物制备最佳条件筛选。将采用逆流浸提工艺生产的新鲜淀粉废水4 000 r/min离心5 min,收集上清液,弃沉淀,以研究废水处理及提取物制备的最佳条件。①筛选沉淀剂Ⅰ号最佳用量。取上清液100 mL,加入不同浓度的沉淀剂Ⅰ号,混匀后,90 ℃加热5 min,冷却后3 500 r/min离心5 min,分析上清液中多糖和蛋白质含量浓度。②筛选最佳加热温度。取上清液100 mL,加 0.2%沉淀剂I号,混匀后在不同温度下加热5 min,冷却后3 500 r/min离心5 min,分析上清液中多糖和蛋白质含量浓度。③筛选最佳加热时间。取上清液100 mL,加0.2%沉淀剂I号,混匀后在90 ℃下加热不同时间,冷却后3 500 r/min离心 5 min,分析上清液中多糖和蛋白质含量浓度。   1.2.2 甘薯淀粉废水处理及提取物制备。取上清液1 000 mL,加0.2%沉淀剂Ⅰ号,混匀后在90 ℃下加热5 min,冷却后在3 500 r/min离心5 min,分离上清液,并收集沉淀。沉淀真空冷冻干燥后,即为甘薯提取物,并计算收率。   1.2.3 多糖含量测定。以葡萄糖为标准品,按蒽酮-硫酸法测定[4]。   1.2.4 蛋白质含量测定。以牛血清白蛋白为标准品,利用紫外分光光度仪在280 nm处检测吸光度[5]。   1.2.5 废水COD分析。采用《水质 化学需氧量的测定 重铬酸盐法》(GB 11914―89)测定。   1.2.6 免疫活性试验。健康昆明种小白鼠,雌雄各20只,分为4组,每组各10只,喂养10 d,用口服方式给予甘薯提取物,然后检测胸腺/体重、脾脏/体重、廓清指数和吞噬指数,按于守洋、马学青等[6-7]方法测定。   2 结果与分析   2.1 不同浓度沉淀剂Ⅰ号对沉淀效果的影响   研究

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