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论新型疫苗研究概况与进展 　　摘要 随着免疫学和分子生物学技术的快速发展，近年来出现了各种不同的新型疫苗，这类疫苗的出现弥补了传统疫苗的缺点，也填补了疫苗种类的空白。就重组活载体疫苗、树突状细胞疫苗、T细胞疫苗、食物疫苗、DNA疫苗、RNA复制子疫苗、多肽疫苗和抗独特型抗体疫苗等8种新型疫苗的研究概况与进展进行论述。 　　关键词 新型疫苗；研究概况；研究进展 　　中图分类号 Q342+.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2009）05-0220-03 　　 　　疫苗是一种用于预防和治疗传染病或某些慢性疾病的生物制品，实际生产中应用最广泛的是传统灭活疫苗和减毒活疫苗，但两者在生产实际中均存在着免疫效果不确实、非特异性反应强、保护期短等缺点，这就使得新型疫苗的出现成为必然，各种新型疫苗的研制越来越多地受到关注。新型疫苗是应用基因工程技术和生物化学合成技术生产的疫苗。笔者就目前出现的几类新型疫苗作一论述。 　　 　　1 重组活载体疫苗 　　 　　活载体疫苗是将编码病原微生物特异性抗原的基因片段插入减毒的活细菌或病毒载体基因组的某些部位，使之高效表达，从而诱生强有力的抗体和细胞介导的免疫应答，使机体获得对插入基因相关疾病的抵抗力。 　　1.1 重组细菌疫苗 　　可作为基因工程疫苗载体的细菌很多，但从疫苗的安全性和能诱导特异性免疫反应的角度出发，减毒沙门菌和卡介苗是最佳载体。在2003年SARS爆发后，研究者们首先考虑用灭活的SARS-Cov来抵御SARS。一般用福尔马林、紫外线或β-丙内酯灭活SARS-Cov。用紫外线灭活的SARS-Cov免疫小鼠可产生体液免疫应答和细胞免疫应答，加强免疫后可观察到细胞增殖和细胞因子表达上调[1] 。He等[2]报道β-丙内酯灭活的SARS-Cov免疫小鼠和兔子都可产生高滴度的抗体，这些抗体能够识别S蛋白特别是RBD，并阻止RBD与ACE2的结合。纯化的灭活SARS疫苗免疫猴子可产生高水平的中和抗体，并能阻止SARS-Cov在猴子体内的复制，该疫苗对猴子是安全且有效的[3]。SARS灭活疫苗的Ⅰ期临床试验在我国已完成，II期临床试验方案已拟订，该疫苗的安全性和有效性有待于进一步评估。由于灭活疫苗不能诱导细胞免疫、免疫原性低、产生免疫力慢及在制备过程中存在较大危险等缺点，故在T细胞表位和B细胞表位被鉴定后，SARS灭活疫苗可能将被取代。 　　1.2 重组病毒疫苗 　　以病毒为载体的基因工程疫苗可视为病毒减毒活疫苗和亚单位蛋白质疫苗的结合，既可避免亚单位疫苗需要佐剂及多次接种注射的缺点，又可诱导全面而持久的免疫反应，可作为减毒活疫苗的病毒载体有痘苗病毒、腺病毒、脊髓灰质炎病毒及单纯疱疹病毒等，其中最常用的是痘苗病毒和腺病毒。 　　痘苗病毒是基因工程中的常用载体，是人类使用了近200年的最为安全的疫苗[4]，而且牛痘苗病毒能感染许多不同类型的细胞，能容纳大分子外源基因，能在感染的早期或晚期高水平地表达外源基因，且病毒的耐热性强，易获得高效价的抗体，是十分理想的载体；能表达牛瘟病毒血凝素或融合糖蛋白抗原的牛痘病毒基因工程疫苗，能产生高效价的中和抗体，并可使牛获得攻毒保护[5-7]是一个成功的例子。禽痘弱毒疫苗株已广泛用于生产禽病重组疫苗。利用禽流感病毒的保护性抗原HA和NA、HA糖蛋白和NA蛋白能够产生有保护作用的抗体，NP有种特异性，能产生有保护作用的抗体和细胞免疫反应。台湾谢快乐等用台湾AIV分离株（H8N4）的外膜蛋白HA和NA制作了免疫复合物亚单位疫苗，同时制作了灭活的油佐剂疫苗，用血凝抑制试验作为评价2种疫苗免疫效果的标准，结果表现差异不明显，只是在加强免疫时亚单位疫苗抗体升高比油佐剂苗明显。Kodihalli S等[8]研制了火鸡H5N2病毒HA和核蛋白（NP）复合亚单位疫苗，发现该疫苗可以对同源和异源亚型病毒的攻击产生保护作用。常规制备亚单位疫苗的过程复杂、成本高，而重组DNA和分了克隆技术的发展恰恰为克服以上缺点提供了可能。John Crawford等[9]利用杆状病毒表达系统表达了H5、H7亚型AIV的HA佐剂疫苗，用这2种疫苗分别免疫3周龄Rock鸡，对高致病性强毒的攻击均能产生100%的保护。 　　基因重组活载体原理制备禽流感疫苗的技术已趋于成熟。2002年，程坚等[10]把H9亚型禽流感病毒HA基因、鸡II型干扰素（IFN-II）基因分别置于痘苗病毒P7.5启动了和鸡痘病毒早晚期启动了PE/ L下游，构建了共表达H9亚型禽流感病毒HA和鸡IFN-II的重组鸡痘病毒。动物试验表明，该重组病毒能显著抑制静脉攻毒后的1日龄SPF鸡及含母源抗体的商品鸡从泄殖腔排毒，并能减轻单表达HA的重组鸡痘病毒抑制1日龄SPA雏鸡增重的副作用。我国哈尔滨的Qi