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鸭疫里氏杆菌病研究进展 　　摘 要：通过RA病原学研究、分子生物学研究、诊断方法研究、防治研究四个方面的阐述，了解目前鸭疫里氏杆菌病的研究进展。 　　关键词：鸭疫里氏杆菌病；研究进展 　　中图分类号：S858.32 文献标识码：A 文章编号：1673-1085（2016）02-0043-06 　　鸭疫里氏杆菌（Riemerella Aanatipestifer，RA）病，曾名鸭疫巴氏杆菌（Pasteurella AanatiPestifer）病，是家鸭、鹅、火鸡及其它家禽和野禽的一种急性、接触性、败血性传染病，又称为新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合症、鸭疫败血症和鸭传染性浆膜炎。鸭疫里氏杆菌感染发病率可达10%～60%，死亡率为30%～90%，是造成养鸭业经济损失严重的传染病之一[1]。到目前为止，美国、英国、西班牙、澳大利亚、加拿大、德国、新加坡、泰国、韩国等均有本病发生。我国，1982年郭璞玉等[2]首次报道北京郊区鸭场于1980～1981年曾发生过此病，并分离到了病原菌。随后全国多个省份都相继报道了此病。 　　1 RA病原学研究 　　1.1 分类地位 1932年美国学者Henderickson和Hilbert对病原菌进行分离鉴定，并称之为鸭疫斐佛氏菌（Pfeifferella anatiestlfer）[3]。1954年Bruner和Fabricant通过比较，建议采用鸭疫莫拉克氏菌（Moraxella anatipestifer）这一名称[4]。此后，在第七版《伯杰氏细菌鉴定手册》中根据其形态与染色特性将其列入巴氏杆菌属，命名鸭疫巴氏杆菌（Pasteurella AanatiPestifer）。1991年Rossau等对原来列入巴氏杆菌属的鸭疫巴氏杆菌（Rasteorella anatipestifer，RA）与黄杆菌/噬纤维菌群的成员进行了比较研究，发现它们具有较多的相似性[5]。1993年Segers等通过分析RA的rRNA（Segers et al.，1993），进一步证实了以上观点。但由于RA在蛋白质及脂肪酸组成、培养特性、酶活性等许多方面又明显不同于黄杆菌/噬纤维菌rRNA同源群中关系较近的其他细菌，因此Segers等提出将RA归入黄杆菌/噬纤维菌rRNA同源群，并建议单列一属，称为里氏杆菌属，其代表种为鸭疫里氏杆菌，并将该菌所引起的疾病命名为鸭疫里氏杆菌病[6]。 　　1.2 血清型 目前报道鸭疫里默氏杆菌共有21个血清型[7-8]，不同血清型之间缺乏交叉保护[9]，其中鸭疫里氏杆菌2型是国内外被频繁分离到的血清型。我国许多地区都有分离到本菌的报道，张大丙等证实国内存在1、2、6、10、11、13和14共7种血清型[10]。 　　1.3 生物学特性 RA菌体呈杆状或椭圆形，偶见个别长丝状，多为单个，少数成双或链状排列。可形成荚膜，无芽孢，无鞭毛。革兰氏染色阴性，印度墨汁染色可见荚膜着色，瑞氏染色时大部分细菌呈两极着色特性[11]。韦强等通过电镜首次观察到了血清l、2型的RA的固体培养物经负染或超薄切片后可观察到约1/3的菌体具有特殊的赘生物形态结构；其内部有类似菌体的结构，有一层类似于菌体的“细胞壁”，但较薄[12]。 　　本菌在巧克力琼脂、血液琼脂和胰酶大豆琼脂中生长良好。多次继代培养可在普通培养基上生长，在麦康凯琼脂上不生长。在胰酶大豆琼脂中添加0.05%酵母浸出物，5%新生牛血清以及含有5%～10%的CO2环境可促进其生长。血液琼脂上培养24h，形成边缘整齐、透明、无色素的光滑型菌落，RA的最适生长温度是37℃。 　　本菌不同的血清型，即使同一血清型的不同菌株的生化反应也不尽相同。总的来说，不发酵葡萄糖、蔗糖，也不发酵半乳糖、乳糖、果糖、木糖、甘露醇、山梨醇、甘露糖和棉实糖。极少数菌株发酵麦芽糖和肌醇。硝酸盐还原、柠檬酸盐利用、VP、甲基红试验、硫化氢产生、尿素分解均为阴性。氧化酶、触酶试验为阳性。多不溶血，多液化明胶[11]。 　　2 RA的分子生物学研究 　　目前，国内外学者从16SrRNA、外膜蛋白、荚膜、质粒、耐药性、致病性及相关因子等方面开展了RA的分子生物学研究。Subramandam等对4株RA编码16srRNA的基因序列的PCR产物进行序列分析，同时与产吲哚黄杆菌、粘黄杆菌等相关细菌进行了同源性分析，结果表明4株RA处于黄杆菌系统发育树上；对PCR扩增的16SrRNA基因经限制片段长度多态性（RFLP）分析表明：即使是同一血清型的不同RA菌株，16SrRNA基因仍有差异[13]。Rimler等运用DNA指纹技术进行了鸭疫里默氏菌DNA指纹图谱的研究，用限制性核酸内切酶HinfⅠ对从美国、英国、澳大利亚、加拿大、德国和以色列6个国家分离的89株RA进行了DNA指纹图谱