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黄芩素对喉癌Hep―2细胞增殖抑制作用 　　【摘要】 目的：探讨黄芩素对人喉癌Hep-2细胞的增殖抑制作用。方法：Hep-2细胞在含黄芩素（10～80 μmol/L）的培养基中，分别培养24 h及48 h，用MTT法检测对细胞增殖的影响；用台盼兰染色法检测对细胞活力的影响；用吖啶橙染色法（AO染色法）检测对细胞形态的影响。结果：黄芩素呈时间-剂量依赖性的抑制Hep-2细胞的增殖，并可使细胞活力明显降低；AO染色法显示，黄芩素可诱导Hep-2细胞形态发生明显变化，呈凋亡形态。结论：黄芩素可抑制喉癌Hep-2细胞增殖，降低细胞活力，诱导喉癌Hep-2细胞呈典型的凋亡形态。 　　【关键词】 黄芩素； 喉癌细胞； 细胞增殖； 细胞活力； 凋亡 　　【Abstract】 Objective：To study the influence of baicalein on proliferation in laryngeal cancer cell Hep-2 in vitro.Method：Hep-2 cells were exposed to baicalein at concentrations from 10 to 80μmol/L， cultured for 24 h or 48 h.MTT was used to determine cell proliferation，trypan blue exclusion experiments was used to evaluate cell viability，acridine orange（AO） fluorescence staining was used to determine the effect on the cell morphology. Result：Baicalein could inhibit the proliferation of Hep-2 cells in a time-and dose-dependent manner.The viability was down regulated by baicalein.AO fluorescence staining showed that the cell morphology was changed by baicalein significantly. Conclusion：Baicalein can inhibit the cell proliferation， viability and induce apoptosis in typical morphology of laryngeal cancer Hep-2 cells significantly. 　　【Key words】 Baicalein； Laryngeal cancer cell； Cell proliferation； Cell viability； Apoptosis 　　First-author’s address：Changchun Medicial College，Changchun 130031，China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.21.002 　　黄芩素（baicalein，BAI）是从传统中药黄芩的根中提取出的一种主要有效成分，它属于黄酮类化合物[1]。一些以黄芩素作为主要成分的制剂应用于抗菌、抗病毒、抗过敏、抗血栓等多种方面疾病的治疗[2-3]。近几年来，一些研究表明，黄芩素可以抑制胰腺癌、皮肤癌、宫颈癌细胞等的增殖，诱导凋亡[4-6]，但具体作用机制尚待深入研究。喉癌是一种常见的头颈部鳞状细胞癌，具有预后不良、高死亡率等特点，局部发生转移的患者又以预后不良、高死亡率为特点[7-10]。目前国内外尚未见黄芩素对喉癌的抑制作用相关研究。本实验拟对不同浓度黄芩素对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制和诱导凋亡作用进行研究，从而为进一步阐明黄芩素的抗癌机制及临床应用提供实验依据。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 人喉癌Hep-2细胞购于上海细胞生物研究所。黄芩素（Baicalein）购于美国SIGMA公司，用DMSO溶解后配成贮存液置于-20 ℃冰箱保存，实验时稀释至所需浓度。胎牛血清、四甲基偶氮唑蓝（MTT）、台盼兰和吖啶橙（AO）购于北京鼎国生物技术公司。RPMI1640培养基购于GIBCO/BRL公司。 　　1.2 细胞培养 喉癌细胞株Hep-2于含5%胎牛血清FBS（经56 ℃ 30 min灭活），100 U/mL青霉素及100 μg/mL链霉素的RPMI1640培养液中，单层细胞培养；37 ℃ 5% CO2孵箱中培养传代，每次传代均以0.