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高花药培养效率粳稻杂交组合筛选 　　摘要 为提高粳稻杂种F1的花药培养效率，利用3个常规品系对6种花药培养诱导培养基进行了筛选，用筛选出的培养基对25个粳稻杂交组合F1进行愈伤组织诱导，并对这些杂交组合的培养力和花培苗的自然结实能力进行比较和分析。结果表明：在所用的6种培养基中SK3培养基的愈伤组织诱导率较高，平均为12.42%；不同F1杂交组合的愈伤组织诱导率、分化率、自然结实株率变幅分别为12.40%～58.76%、2.01%～58.15%和6.25%～100.00%，平均分别为35.60%、21.55%和54.07%；不同杂交组合的花药培养力和花培效率具有很大的差异，变幅分别为0.76%～16.40%和0.05%～9.57%，平均分别为7.04%和3.81%；筛选到培养力在10%以上的杂交组合6个，培养效率在6%以上的杂交组合5个。 　　关键词 粳稻杂种F1；花药；培养力；培养效率 　　中图分类号 S511.038 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）16-0044-03 　　水稻是世界上最重要的粮食作物之一，1968年其花药培养获得了成功[1]。随后，利用该技术选育水稻品种受到各国育种家的普遍重视。我国于20世纪70年代开始花药培养育种，选育出了一大批水稻新品种，创造了巨大的社会效益和经济效益[2]。目前，水稻花药培养技术与传统育种、转基因、物理化学诱变技术等相结合，已成为水稻育种的一个卓有成效的技术领域[3]。水稻花培育种有许多优势，但其效率并不是很理想，主要原因在于花培诱导率、绿苗分化率低，即花药培养力低。花药培养力的高低由愈伤组织诱导率和分化率所决定。尽管影响花药培养力的因素众多[4-5]，但大量的研究结果表明水稻花药培养力是可遗传的数量性状[6-10]，基因型是其中的一个关键因素，一般认为粳稻培养效率较高，籼粳杂交后代居中，籼稻培养力低[4]。然而，即使是培养力相对较高的粳稻，由于基因型的差异，不同品种的花药培养力及其配合力也有很大差别[11-12]。因此，通过不同基因型的合理搭配，有可能进一步提高粳稻杂交组合的花药培养力。为此，对25个不同粳稻杂交组合的花药培养力和培养效率进行分析，以筛选花药培养力和培养效率较高的组合。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　所用材料有2类，一类是常规品种嘉粳5189、紫兴101和紫兴111，用于诱导培养基的筛选。其中嘉粳5189、紫兴101为粳稻，紫兴111为籼粳交后代选育的偏籼品系，嘉粳5189由嘉兴市秀洲区农科所提供，紫兴101和紫兴111为自行选育的稳定品系。另一类是25个粳稻F1杂交组合，分别为：2845/AP13、P340/29185、AP13/W1125、AP13/3034-2、2265/2312、2266/29185、2282/AP13、2282/29185、2312/AP13、2312/武运粳24、2312/QP60、2312/29185、1206/2204、1206/QP60、W1125/武运粳24、武运粳24/2845、武运粳24/29185、W1158/武运粳24、W1158/29185、29185/AP13、QP60/省反04、QP60/2312、QP60/2317、QP60/29185、29185/龙粳88。由江苏（武进）水稻研究所提供。这些材料2012—2013年在海南南繁基地种植，取材后空运至实验室进行预处理和接种培养。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 取样与预处理。当供试材料的颖花呈黄绿色，花药伸长至颖壳的1/3～1/2时，将整个稻苞取回，置于5 ℃下预处理10～12 d。接种前用70%酒精表面消毒30～60 s，然后在1%次氯酸钠中浸泡10～15 min，用无菌水冲洗后即可取花药接种。 　　1.2.2 愈伤组织诱导培养基的筛选。收集嘉粳5189、紫兴101和紫兴111的花药，分别接种于6种培养基上，这6种培养基分别是N6[13]、SK3[14]、M8[15]、B5[16]、MS[17]以及由MS大量元素与B5微量元素和有机物组成的NB培养基。所有培养基（pH值为5.8）的碳源均为3%蔗糖+3%麦芽糖，含2，4-D 2 mg/L、NAA 2 mg/L和琼脂粉7 g/L，pH值为5.8。每份材料每种培养基分别接种2 000枚花药，置于26 ℃下暗培养，25～40 d时对所出愈伤数量进行统计，通过愈伤组织诱导率（诱导愈伤组织数/接种花药数×100）的比较来筛选适宜的诱导培养基，以用于不同杂交组合的培养。 　　2 结果与分析 　　2.1 高诱导率培养基的筛选 　　6种培养基对3个水稻品系花药愈伤组织的诱导见表1。可以看出，3个品种的平均诱导率为4.995%。从不同材料来看，嘉粳5189、