蝉花多糖与复合多糖抗肿瘤作用的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

汕头大 汕头大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 摘 要 目的： 初步研究野生蝉花多糖及其复合多糖的抗肿瘤活性与其作用机理。 方法： 1）采用响应面法优化微波-超声波辅助提取蝉花多糖的工艺条件。 2）以复合多糖对?OH 清除率为指标，采用 L9﹙33﹚正交试验对蝉花复合多糖配方进 行优化。 3）MTT 法考察单味蝉花多糖体外对 HeLa 细胞增殖的影响；建立小鼠 S180 肉瘤移 植瘤模型，考察蝉花多糖对荷瘤小鼠 S180 肉瘤的抑制作用并测定其对机体免疫及抗氧化 应激系统的作用。 4）以蝉花复合多糖为受试物，考察其对 S180 肉瘤小鼠的抗肿瘤活性，同时测定机 体免疫系统及抗氧化应激系统各项生化指标。 结果: 1）蝉花多糖提取的最佳工艺条件为：料液比 55.2︰1、超声作用时间 25min、微波作 用时间 5min。在此条件下，蝉花多糖得率为 5.58±0.012%。蝉花多糖经 DEAE-52 分离纯 化得到组分 CSP-Ⅰ、CSP-Ⅱ，经红外光谱鉴定为具有 β-糖苷键的多糖。 2）复合多糖最优配比为:蝉花多糖﹕灵芝多糖﹕香菇多糖=2﹕1﹕2。 3）蝉花多糖浓度为 800μg/mL 时，其体外对 HeLa 细胞的抑制率达到 61%，并呈现 一定量效关系；体内抗肿瘤结果显示，蝉花多糖有一定抗肿瘤作用。当多糖给药剂量为 200mg/kg bw d-1 时，对荷瘤小鼠 S180 抑瘤率达到 42.9%。同时，荷瘤小鼠免疫器官指数 显著增大（P＜0.01），并激活或者促进了淋巴细胞的增殖分化，对荷瘤小鼠机体抗氧化应 激系统也起到一定保护和修复作用。 4）蝉花复合多糖对 S180 荷瘤小鼠体内具有较强抑瘤活性，当给药剂量为 200mg/kg bw d-1 时，其抑瘤率达到 50.2%。同时，蝉花复合多糖对机体免疫系统及抗氧化应激系统均 表现出较好的保护作用。 I 结论: 蝉花多糖及其复合多糖均表现出较强的抗肿瘤活性，复合多糖较蝉花多糖表现出更强 的抗肿瘤活性，呈现协同增效作用。当给药剂量为 200mg/kg bw d-1 时，复合多糖抑瘤率 较蝉花多糖高 7.3%。其抗肿瘤作用机制主要通过提高机体免疫系统功能及增强机体抗氧 化应激能力得以实现。 关键词：蝉花多糖；响应面分析法；抗肿瘤；免疫增强；抗氧化应激；协同增效 II ABSTRACT Objective: Antitumor activity and primary mechanism of wild Cordyceps sobolifera polysaccharide and compound polysaccharides composed with Cordyceps sobolifera polysaccharide, Lentinan, Ganoderma lucidum polysaccharides was investigated. Methods: Microwave-ultrasonic auxiliary extraction process of wild Cordyceps sobolifera polysaccharides was optimized by response surface methodology. Based on the clearance rate of compound polysaccharide on ? OH, the optimum formula of Cordyceps sobolifera compound polysaccharide was obtained by orthogonal design. MTT method was used to determine the inhibition effect of single Cordyceps sobolifera polysaccharide on HeLa cells proliferation. The inhibition effect of Cordyceps sobolifera compound polysaccharide on mice with transplanted S180 sarcoma was investigated and determined its effect on the body immunity and anti-oxidative system. S180 sarcoma mice model was established and determined the antitumor activity of Cordyceps sobolifera compound polysacchari