姜黄素调节B淋巴瘤细胞p300和HA1的研究..docVIP

姜黄素调节B淋巴瘤细胞p300和HDAC1的研究 ：吴青，陈燕，李新刚，唐元艳 】p300是一种具有组蛋白乙酰化酶活性的转录 辅助因子，HDAC1是一种组蛋白去乙酰化酶。本研究查明姜 黄素对B-NHL细胞株Raji细胞增殖的影响，并探讨这种影 响与p300以及HDAC 1转录调节表达的关系。以不同浓度（P mol/L）的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞，用MTT法检测 细胞生长抑制率，Annexin-V-FITC /PI双标流式细胞术检测 细胞的凋亡率和应用RT-PCR和Westernb lot法检测Raji细 胞中HDAC1和p300的mRNA表达和蛋白含量的变化。结果表 明：姜黄素对R a j i细胞抑制作用呈明显的时效和量效关系。 24小时的IC50为25umo/L；姜黄素能够诱导Raji细胞凋 亡，凋亡率为%-%，并呈浓度依赖性。姜黄素明显抑制HDAC1 和p300的活性和表迗。在IC50浓度时，随着时间的延长， 其p300和HDAC 1 mRNA表达和蛋白含量逐渐降低，呈时间依赖 性，与对照组相比有显著性（P 关键词】B淋巴瘤 RegulatoryEffectdHDAClinB-NHLCellsAbstractThepurpos nvestigatetheeffec ferationofB—NHLRaj RegulatoryEffect dHDAClinB-NHLCells AbstractThepurpos nvestigatetheeffec ferationofB—NHLRaj ofCurcuminonp300an eofthisstudywastoi tofcurcuminonproli icelllineandexplor etherelationshipbe tweenthiseffectand regulatoryexpressi onofp300andHDAClin vitroculturedRajic ellsweretreatedwit hcurcuminatvarious concentrations( u mo 1/L) andatdifferent timepoints (0,6, 12, 24and48hours), thei nhibitoryratioofce 11 growthwasmeasure dbyMTTassay, thecel lapoptosisratewasd etectedbyflowcytom etrywithAnnexinV-F ITC/PI doublestain ing ， thechangesofp3 OOandHDAC 1 mRNAexpr essionandprotEinle velinRajicellswere determinedbyRT-PCR andWesternresultss howedthatthecurcum incouldinhibitRaji cellproliferationi nsignif icanttime-a ndconcentration-de pendentmanners, IC5 0at24hourswas25 p mo 1/L；thecurcumincou ldinduceapoptosiso fRajicellsinconcen tration-dependentm anner ， apoptosisrat ewas%-%. Thecurcumi n signifleantlyinh ibitedactivityande xpressionofp300and IC50concentration ， expressionofp300an dHDAClmRNAandprotE Inleveldecreasedwi th time-dependentm anner ， differencebe tweentestedandcont rolgroupswassignif icant (PKeywords cu rcumin； B-NHL； Rajic ell； p300； HDAC1 姜黄素(curcumin, Cur)是从姜黄根茎中提取的一种酴 性色素，其药理作用特性有抗炎、抗肿瘤、抗动脉硬化、抗 病毒等。体外研究表明，姜黄素抑制癌细胞增殖和诱导凋亡 是通过多条通路和调节多种肿瘤表面标记因子实现的，而且 其作用靶点可以从DNA、mRNA到蛋白质水平［1］。 p300是一种重要的组蛋白乙酰基转移酶，它能乙酰化核 心组蛋白N末端的赖氨酸残基使核小体组蛋白与DNA的结合 稳定性下降，进而使转录机器与染色体的结合成为可能［2］。 在细胞中可与多种基因转录活化因子结合而形成辅化因子 复合体。除乙酰化作用外，p3 00还可