番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号通路及肝脏葡萄糖异生的调控机制研究-中西医结合专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期：2014 年 5 月 6 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 不保密 ?。 （请在相对应的方框内打―√‖ ） 学位论文作者签名： 日期： 2015 年 5 月 8 日 导 师 签 名 ： 日期： 2015 年 5 月 8 日 天津医 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 背景：随着全球经济的发展和人们生活方式的改变，整个世界糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)的患病率持续上升。据2011年国际DM联盟（IDF）最新数据，截止 2011年全世界DM患病人数已达3.66亿，预计到2030年, 全球成人DM患病人数将 增加到5.22亿 [1]。DM是由多种原因引起的以慢性高血糖为特点的代谢紊乱性疾 病，并且伴有因胰岛素（Insulin,INS）分泌缺陷引起的糖、脂和蛋白质代谢异常。 1型DM以INS分泌绝对不足为主；2型DM以INS抵抗为主，伴INS分泌相对不足； 长期持续的高血糖会导致广泛的周围组织和器官损害 [2]。继肿瘤、心血管病之 后，DM已成为第三大严重威胁人类健康的慢性疾病。目前西医临床主要采用口 服降糖药和INS强化治疗的方式来延缓DM发展，但这些药物有时还是无法达到 预期的治疗效果，且存在多种副作用，对损伤的胰岛也没有保护作用。所以寻 找一种控制血糖的简便易行、安全可靠的方法，对DM的预防和治疗十分重要。 番石榴叶（Psidium guajava L）为桃金娘科番石榴属植物，近年来的研究显示番 石榴叶具有较好的抗DM作用, 但其作用机制研究尚不广泛深入。本文研究番石 榴叶总黄酮提取物降血糖作用及其机制，为开发新的降糖药物提供参考依据。 目的：研究番石榴叶总黄酮提取物对DM小鼠肝脏葡萄糖代谢、胰岛素信号通路 相关分子表达、肝脏葡萄糖异生的调控机制及对胰岛的保护作用，探索其降糖 作用机制。 方法：雄性BALB/c小鼠，腹腔注射链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）60 mg.kg-1 连续5 d后，血糖仪检测空腹血糖水平，以连续3d空腹血糖浓度11.1mmol.L -1为 糖尿病模型成功标准。DM小鼠随机分为模型组和番石榴叶总黄酮提取物治疗 组，每组10只，另设10只正常对照小鼠。治疗组剂量以相当于生药16.5g kg-1.d-1 番石榴叶总黄酮提取物灌胃，正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃，2周后测其 空腹血糖、体重、Elisa测其血清胰岛素(INS)水平、病理观察胰岛数目及形态学 改变、免疫组化观察胰岛素分泌量、荧光PCR法检测肝葡萄糖激酶（glucokinase ， GK）、葡萄糖激酶调节蛋白（glucokinase regulatory protein,GKRP）、葡萄糖转运 蛋白 -2 （ glucose transporter 2 ， GLUT-2 ）、胰 岛 素 生长 因 子 -1(insulin growth factor-1,IGF-1)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)、胰岛素受 体底物 -2(insulin receptor substrate-2,IRS-2) 和 糖 异 生 酶 葡 萄 糖 -6- 磷酸 酶 （ glucose-6-phosphatase ， G-6-pase) 与 磷 酸 烯 醇 式 丙 酮 酸 羧 激 酶 I （phosphoenolpyruvate carboxykinase ，PEPCK)表达；Western blot测肝脏葡萄糖 转运蛋白-2（glucose transporter 2，GLUT2）的表达。 结果：与正常组比，模型组小鼠体重明显降低（P0.01），血糖明显升高（P0.01）； 胰岛周围胰岛素（INS）分泌量和血清胰岛素(INS)分泌量均明显下降；胰岛变性 明显，胰岛数目明显减少、体积变小、甚至消失；肝GK，GLUT2， IGF-1，IRS-1 和IRS-2表达下降，GKRP，G-6-pase和PEPCK表达升高，Western blot显示