高迁移率族蛋白1在急性出血坏死性胰腺炎大鼠全身毛细血管渗漏和急性肺损伤中的作用的实验分析-外科学(普外科)专业论文.docxVIP

华中科技走学同济医学院 华中科技走学同济医学院 博士学位论文 前言 急性胰腺炎(AP)是临床上常见的急腹症之一。近年来发病率有逐渐上升的趋势。 其中重疰急性胰腺炎(SAP)的发病急、病情凶险、转归复杂，除少数大型练会性医院 外，死亡率可达10％～20％以上，早期主要死于多器官功能不全综合征(MODS)，晚期 主要死于腹腔内大盘管出血等严重并发症。阐明SAP的发瘸机理是提高救治率的关键 之一。 目前认为，AP是胰腺消化酶被激活后对本器官及其周围脏器产生消化作用而引起 的严重的全身炎症反应性疾病 。胰腺局部的病变触发了炎症细胞因子网络的“瀑布” 样反应，TNF．旺、IL．1B等初级炎症细胞因子早期大量释放入血，进一步诱导自身及其 他多种细胞因子大量产生，造成炎症反应的失控，导致严重的全身炎症反应，被称为全 身炎症反应综合征(SIRS)[21。SIRS持续发展，炎症介质损伤重要脏器，是导致SAP 早期的M∞S或多器官功§§衰竭(MOF)鹊重要原因。 但是。大量研究显示目前所知的炎症介质水平的变化与AP病情的进展程度并不一 致13j。诸多炎症介质水平下调之后，AP的病理生理改变仍不断恶化。提示有其他的原 因参与了AP的进展，其中可能包括新的晚期炎症介质。 廷跫奎璧堇魁堡跫望!．≥—嫠一类广泛存在于真核细胞内的菲组核蛋臼，丰富 程度仅比核组蛋白低不到十倍，在每个典型的哺乳动物细胞内约有106个分子14】。它是 HMGBl家族的三种蚤白质之一。其序列具有高度保守性，氨基酸序列在人与大鼠、小 鼠、猪等动物间的一致性超过90％，包括三个不同的结构域，两个同源DNA结合域， HMG盒子A和HMG盒子B，每个长约75个氨基酸，碳末端区域包含一个连续的谷氨 酸或天冬氨酸长臂，带大量受电荷[5l。 以往的研究显示，HMGBl在细胞内是一个重要的转录调节因子【6。91，在细胞外与 细胞的生长、分化有关陋141。1999年Wang等首先在{Science))上报道f15】，小鼠巨噬细 胞系RAW264．7在受到内毒素(LPs)刺激后，先有TNF．俚分泌，其后分泌HMGBl作 为延迟的炎症介质，此时TNF．a已下调；RAW264．7细胞系在受TNF．a和IL．I刺激后， 也可分泌HMGBl；给小鼠注射抗HMGBl抗体能减轻LPS诱导的内毒素血症；相反给 小鼠注射HMGBl导致中毒性休克：而且败血瘟病人血清HMGBl水平升高，并与病死 率呈正相关。因此他们认为，HMGBl可能由巨噬缨胞分泌，作为重要的晚期炎症介质 重 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士学位论丈 参与了脓毒症的病理生理过程。 此后，有关炎症因子HMGBl的报道陆续出现。HMGBI不仅可由巨噬细胞受到炎 症刺激后释放，而且它自身亦激起延迟的炎症反应，与熟知的炎症刺激因子LPS相比， HMGBl导致延迟的和双时相的TNF．ct释放。有研究证实垂体后叶受到特异刺激如 TNF．n和IL．1 B能分泌HMGBl，为免疫和神经内分泌系统间提供重要连接，提示 HMGBl也参与炎症过程中免疫反应和神经内分泌调节【1“。近两年来陆续有HMGBl激 活单核细胞n71、PMNs[181释放包括趋化因子在内的炎症介质，刺激血管内皮细胞表达黏 附分子和趋化园子【191的报道。 作为TNF．a的下游因子。HMGBl是否也参与了AP的炎症反应?在AP的进展中 扮演了何种角色?目前尚无相关研究报道。 本课题以急性出血坏死性胰腺炎(Am旧)大鼠模型为对象进行了相关研究。 全身毛细血管渗漏(SCL)是AP发生后的一个重要的病理生理改变，主要表现为 大量的体液丢失在组织间隙及“无效死腔中”。SCL是造成循环不稳定、肺水肿、腹压 升高的主要原因，其程度与患者的预后直接相关【201。其原因是，在大量炎症介质的作用 下，全身毛细血管受损、通透性增加、蛋白和液体渗漏。血管内皮细胞(EC)形态学改 变是毛细血管受损的表现之一。正常EC以及静态培养的融合单层EC的肌动蛋白微丝 (F．actin)主要分布在细胞的周边形成致密周围束，细胞间连接紧密。当受到外界刺激 时，细胞通过多种信号转导的途径介导F．actin发生重组、致密周围束消失、应力纤维 形成，细胞形态也随之改变，导致细胞间缝隙增大、增多，通透性升高121-23】。有研究显 示HMGBl可刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成和表达黏附分子、分泌趋化因子 IL．8、粒细胞集落刺激因子(G．CSF)[191。但其对血管内皮通透性的影响未见报道。本 课题从体内和体外两个层面进行了研究