钙镁离子环境改变对人恶性胶质瘤原代细胞侵袭力影响的体外研究病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

郑 郑 州 大 学 20 ()9 年 硕 士 毕 业 论 文 摘 要 采 用 S P 法 ， 对 星 形 细 胞 瘤 检 测 胶 质 纤 维 酸 性 蛋 白 ( G E A P ) 、 W 型 胶 原 (C o lla罗n IV ) 和 巢 蛋 白(nestin)的表 达 。对 室 管 膜 瘤 细 胞 检 测 G E A p 、C D 9 9 和 E M A 的 表 达 。 6 .B o yden eham ber 实 验 B o yd en ch am b er 小 室 测 定 原 代 培 养 的111级 、Iv 级 星 形 细 胞 瘤 细 胞 及 11级 、111 级 室 管 膜 瘤 细 胞 ，在 相 同 的 培 养 时 间和 不 同 的培 养 条 件 下 ，观 察 钙 镁 离 子 影 响 下 的 不 同级 别 的胶 质 瘤 细 胞 侵 袭 力 的差 别 。 7 . 明胶 酶 谱 法 检 测 M M P 一2 酶 和 酶 原 的表 达 情 况 。 明胶 酶 谱 法 检 测 不 同浓 度 钙 镁 离 子 影 响 下 的 不 同级 别 的胶 质 瘤 细 胞 M M P 一2 酶 和 酶 原 的 表 达 情 况 的 差 别 ，从 而 判 断 体 外 钙 镁 离 子 浓 度 的 不 同对 胶 质 瘤 细 胞 侵 袭 力 影 响 的 差 别 。 8 .统 计 学 处 理 以上 结 果 用 S P S S 10.O 软 件 进 行 统 计 处 理 ，数 据 结 果 采 用 X 士 S 表 示 ，方 差 分 析 ， 以 a = 0.0 5 为 显 著 性 水 平 。 结 果 1常 规 病 理 检 查 诊 断 为 星 形 细 胞 瘤 的 手 术 标 本 20 例 ，共 培 养 成 活 16 例 ，其 中n l级 ( 间变 性 星 形 细 胞 瘤 ) 7 例 ， W 级 (胶 质 母 细 胞 瘤 ) 9 例 ; 室 管 膜 细 胞 瘤 的 手 术 标 本 n 例 ，成 活 9 例 ，其 中 室 管 膜 瘤 ( n 级 ) 7 例 ， 间变 性 室 管 膜 瘤 (I 11 级 ) 2 例 。 2 .原 代 培 养 : 应 用 物 理 和 化 学 方 法 ，成 功 地 培 养 出 星 形 细 胞 瘤 和 室 管 膜 瘤 原 代 细 胞 。肿 瘤 级 别 不 同 ， 细 胞 的 生 长 活 性 不 同 ，其 中 m 级 、 W 级 星 形 细 胞 瘤 可 以 成 活 并 可 稳 定 传 代 4 一6 代 (约 28d )，Il，m 级 室 管 膜 瘤 可 以成 活 且 能 传 4 一5 代 (约 2 5 d ) 。 3.形 态 学 观 察 : 倒 置 显 微 镜 下 ，发 现 细 胞 形 态 多 样 ，大 小 不 一 ; 其 中 星 形 细 胞 瘤 细 胞 呈 星 形 、三 角 形 、菱 形 或 梭 形 。肿 瘤 级 别 越 高 ，细 胞 贴 壁 时 间 越 短 ，生 长 越 旺 盛 ，并 呈 交 错 性 生 长 (细 胞 失 去 极 性 ); 室 管 膜 瘤 细 胞 呈 玫 瑰 花 结 状 排 列 ， 大 小 不 一 ， 胞 质 丰 富 ， 无 分 枝 状 突 起 。 4 .免 疫 细 胞 化 学 检 查 : 原 代 培 养 的 星 形 细 胞 瘤 G E A P 呈 阳 性 、 IV 型 胶 原 c oflage n w 呈 阴 性 ，ne sti n 阳 性 ( W 级 星 形 细 胞 瘤 ); 原 代 培 养 的 室 管 膜 细 胞 瘤 郑 郑 州 大 学 2以刃 年 硕 士毕 业 论 文 摘 要 G E A P 呈 阳性 、C D 99 阳 性 ，E M A 阴性 。为 此 ，结 合 细 胞 的形 态 、生 长 方 式 及 免 疫 细 胞 化 学 结 果 ，证 实 所 培 养 的细 胞 分 别 为 星 形 细 胞 瘤 细 胞 和 室 管 膜 细 胞 瘤 细 胞 。 5 .B oy de n 小 室 体 外 侵 袭 实 验 结 果 : 原 代 培 养 的m 级 、W 级 星 形 细 胞 瘤 细 胞 ， Il，n l 级 室 管膜 瘤 细 胞 随着 体 外 钙 离 子 浓 度 的升 高 ，其 穿膜 细 胞数 先 增 高后 降低 ， 随着 镁 离 子浓 度 的升 高 ，其 穿膜 细 胞 数 呈 降低 趋 势 。在 侵 袭 实验 中 ，在 相 同 的