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人脐带mscs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗作用的研究外科学专业论文
河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺
河北医科大学
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本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。
否则,承担相应法律责任。 :≯,:j;一t、.
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河北医科大学研究生学位论文独创性声明
本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。
研究生签名: 导师擗鳓
加眵年弓归勉日
万方数据
目
目 录
中文摘要 .1
英文摘要 .4
英文缩写 .8
研究论文人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗 作用的研究
前言日U舌 .9
材料与方法 .9
结果 .1 6
附图 19
附表 28
讨{仑 .3 1
结论 .36
参考文献 37
综述MSCs对肾脏缺血再灌注损伤改善作用的研究进展 41
致谢 ..52
个人简历 53
万方数据
中文摘要人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗作用的
中文摘要
人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗作用的 研究
摘 要
目的:从形态学及细胞免疫表型两个方面评判组织块贴壁法分离人脐 带MSCs的可行性及生化功能的完好性,从生化指标(血胱抑素C、血肌 酐值水平)、肾组织切片HE染色以及肾组织中VEGF、CTGF两项纤维 化相关蛋白的表达水平三个不同角度研究人脐带MSCs移植对不可逆性 梗阻性肾损伤的治疗和改善作用,为人脐带MSCs在梗阻性肾病的临床应 用提供进一步的实验和理论支撑。
方法: 1运用组织块贴壁法分离新鲜脐带的MSCs,在光镜下观察提取的人
脐带MSCs的细胞形态,运用流式细胞检测仪测定细胞的免疫表型。 2选取清洁级大鼠90只,随机分成模型组(单侧输尿管梗阻组,n-30,
大鼠行右侧输尿管结扎术,术后10天尾静脉注射生理盐水lml),治疗 组(单侧输尿管梗阻+人脐带MSCs移植组,n=30,大鼠行右侧输尿管结 扎术,术后10天尾静脉注射含1x107MSCs的生理盐水lml)和对照组(假 手术组,n=30,分离右输尿管但不结扎输尿管,术后10天经尾静脉注生 理盐水lml)。三组大鼠分别于人脐带MSCs移植后1周、2周、4周共3 个时间点各取10只,抽血后处死取肾标本,行血胱抑素C水平、血肌酐
值的测定,肾组织切片HE染色的观察以及肾组织中VEGF、CTGF两项
纤维化相关分子在Western Blot检测中的表达水平的研究。 3实验所得数据用SPSS Statistics 19软件进行统计学处理,其中计量
资料以均数±标准差(夏±s)表示。检验标准为P=0.05。 结果:
1组织块贴壁法提取的人脐带MSCs,在显微镜下可观察到与成纤维 细胞形态相似的细胞。流式细胞检测示分离细胞表达CD90、CD73、CDl05
而不表达CDl9、CD34、CD45、CDl 16及mA—DR,其免疫表型符合人
间充质干细胞特征。 2在人脐带MSCs移植后不同时间点,模型组和治疗组大鼠同组间测
万方数据
中文摘要得的血肌酐值和血胱抑素C水平均有显著差异(尸O.05),而在同一时
中文摘要
得的血肌酐值和血胱抑素C水平均有显著差异(尸O.05),而在同一时 间点三组间的这两项指标亦有明显的差异(PO.05)。
3在人脐带MSCs移植后不同时间点,治疗组与模型组的肾组织病理 改变均表现为明显的肾小管空泡样扩张、炎性细胞浸润和间质纤维化改 变。组织病理学评分方面,模型组在移植后早期相对较轻,而2W后则持 续恶化(尸O.05)。此外,治疗组病理损伤严重程度明显较同一时间点的 模型组轻,但是在2W后也出现恶化趋势(尸O.05)。
4模型组VEGF蛋白表达水平随时间进展呈先增加后减少趋势,且 在人脐带MSCs移植后三个时间点的表达水平均较对照组强(PO.05), 治疗组在移植后1W时VEGF蛋白表达水平较对照组明显增强,在2W时
到达顶峰,之后再度出现下降且在4W时弱于同组1W时表达量(氏O.05)。
5对照组CTGF蛋白表达水平最弱(PO.05),模型组与治疗组均在 移植后1W时的表达量最高,往后随时间进展呈递减趋势,至移植后4W 达最低水平(PO.05),但无论在移植后哪个时间点,治疗组CTGF蛋白 表达水平始终较模型组弱(尸O.05)。
结论
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