薄芝糖肽注射液质量标准和检测方法的研究药物分析专业论文.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进 原创性声明 本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进 行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、 数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究 成果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：蛰塑盘一 日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解广西中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意 学校保留并向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许论文 被查阅和借阅。本人授权广西中医药大学可以将学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段 保存、汇编学位论文。 (保密论文在解密后遵守此规定) 论文作者虢堑丝 导师签名： El 期：盈虚!复：缉 万方数据 ／㈣掣薄芝糖肽注射液质量标准和检测方法的研究 ／㈣掣 薄芝糖肽注射液质量标准和检测方法的研究 中文摘要 目的：多糖及多肽类的大分子药物受到人们越来越多的研究和关注， 然而其质量控制还处于比较低的水平，现行的质量标准不能全面的反映 和控制药品的质量。本课题选取薄芝糖肽注射液作为研究对象，对其成 分及结构组成进行相关研究，为这种药物的质量标准提高提供相关研究 基础，也可以为这类药物的进一步研究开发和质量控制提供参考。 方法：本课题主要对薄芝糖肽注射液进行了以下几方面的研究。1． 采用离子色谱法对薄芝糖肽注射液的单糖组成及游离糖进行研究。以 CarboPac PAl0(4x250 mm)为分析柱，CarboPac PAl0(4x50 mm)为 保护柱；淋洗液经过优化后采用28 mmol／L KOH溶液(淋洗液发生器自 动生成，充氮气保护)，在流速O．8 mL／min，柱温30℃的条件下进行测定， 安培检测器采用积分脉冲检测。2．采用一些简单的化学方法和波谱方法对 薄芝糖肽注射液的成分及可能的结构进行分析。用硫酸蒽酮法和硫酸苯 酚法测定多糖的含量；福林酚法测定多肽的含量；借助紫外分光光度计， 通过13一消除反应判断糖肽的连接方式，以及高碘酸氧化判断糖苷键的类 型。3．建立柱前AQC衍生一高效液相色谱法测定薄芝糖肽注射液里水解之 后的氨基酸和游离氨基酸的方法。内标选用Q一氨基丁酸，柱前衍生化试 剂选用6．氨基喹啉基一N．羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)，色谱柱使用 Kromasil C18柱(250 1TIIYI×4．6 rnnl，5 gm)，缓冲液选用140 mmol／L乙酸 铵(pH 5．00)和60％乙腈溶液为流动相，按照一定的梯度进行洗脱，检 测波长选用248 nlTI。4．建立薄芝糖肽注射液的高效液相色谱(Ⅷ)LC)指 纹图谱。色谱柱选择】33ridgeTM C18(4．6 mmx250 mlTl，59m)，水溶液作 为流动相A，乙腈溶液作为流动相B，按照一定的梯度进行洗脱，检测 波长选用210nm，柱温采用30℃，进样量为20此，流速选择1．0 mL／min。 万方数据 按照标准计算不同批次的薄芝糖肽注射液之间的相似度。结果：1．在建立的离子色谱条件下，两种糖醇和六种单糖组分可以 按照标准计算不同批次的薄芝糖肽注射液之间的相似度。 结果：1．在建立的离子色谱条件下，两种糖醇和六种单糖组分可以 获得较好分离，且薄芝糖肽注射液中含有甘露醇、葡萄糖，少量的鼠李 糖、阿拉伯糖以及微量的岩藻糖。2．实验结果表明，薄芝糖肽注射液中多 糖含量为1．23～2．38mg／mL，多肽含量为O．17～0．31 mg／mL，糖肽的连接方 式为O一型糖肽键，糖苷键的类型为1—2和1—6糖苷键。3．用建立的柱 前衍生一高效液相色谱法测定了薄芝糖肽注射液中1 7种游离氨基酸和水 解后氨基酸的含量。4．薄芝糖肽注射液的HPLC指纹图谱标示出7个共有 峰，结果显示，10批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度在0．954以 上。 结论：建立的测定单糖组成的离子色谱法专属性好，灵敏度高，适 合于薄芝糖肽注射液中的单糖组成测定。薄芝糖肽化学成分测定研究， 有助于深入开展薄芝糖肽质量标准研究和提高质量控制水平。建立的柱 前衍生色谱法能够很好的分离与测定18种常见氨基酸，建立的方法符合 方法学验证要求，适用于薄芝糖肽注射液中的氨基酸定量测定。建立的 薄芝糖肽注射液的HPLC指纹图谱分析方法，精密度良好，稳定性和重 复性也良好，且操作简便可行，故可作为薄芝糖肽注射液的质量控制方 法之一。 关键词：薄芝糖肽注射液，单糖，氨基酸，离子色谱，指纹图谱 万方数据 Research Research on the quality