基于斑马鱼模型的全氟辛酸免疫毒效应及机理研究-生态学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 杭州师范大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或 撰写过的研究成果，也不包含为获得 杭州师范大学 或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了 明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 杭州师范大学 有权保留并向国家有关部门或机 构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权 杭州师范大学 可 以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 杭州师范大学硕士学位论文致谢 杭州师范大学硕士学位论文 致谢 致 谢 三年的研究生生活既让我感到时光荏苒，光阴似箭，好似昨日才踏入美丽的 校园，漫步于惠风湖畔，享受着荷香旭日，柳翠桃红；同时又让我感到岁月有痕， 催人成长，因为我知道现在的我已经不再是当初那个对科研的懵懂无知的小姑 娘，而是一位正在成长成的科研工作者。在此，我要感谢每一位帮助过我的人， 是你们的温暖给了我继续在科研道路上走下去的动力。 首先要感谢我的导师张杭君教授，他不但将我领进生态毒理学的殿堂，而且 敢于放手，让我能够展开手脚，做自己喜欢的研究，并让我寻找到未来的科研方 向。此外，他严谨的科研态度，科学的工作方法以及忘我的工作精神也是我学习 的榜样，并对我产生了深远的影响。其次，我要感谢课题组的贾秀英教授，她平 时不仅会针对我们的科研工作提出宝贵的意见，还常常关心我们的生活，让我们 感到家的温暖。 然后，我要感谢其他所有教导过我，帮助过我的各位老师，特别是生命与环 境科学学院的倪伟敏老师，丁颖老师，金仁村老师，浙江大学黎君英老师，以及 中国计量学院刘军老师。正是在你们的帮助与鼓励，才能让我顺利的完成毕业论 文，并对未来的科研道路充满勇气与信心 同时，我要感谢一直关心与支持我的同学和朋友们！我的师姐邵丹丹，吴应 珠和蔡晨晨，我的师兄叶斌辉和蒋晓军，感谢你们的帮助与关心，让我入学后可 以尽快适应研究生生活。感谢我的师妹王丹丹和高娜娜，师弟王彬浩和王士运， 以及我的学弟学妹们鲁莉萍，马佳乐，沈旭丹，侯萍，谢宁宁，林康，曾少媛等， 感谢你们的一直以来的支持与帮助，让我感受到课题组的温暖。感谢我的室友周 梦瑶，李婷婷和高原，是你们三年来的关心照顾，让我享受到友情所带来的快乐。 此外，我要感谢杭州师范大学生命与环境科学学院，正是这一广阔的科研平 台，让我可以不断吸取新知，充实自己，为未来的科研工作做好准备。 最后，我还要感谢我的父母家人，正是你们的支持与鼓励，才让我可以静下 心来做研究，可以说没有你们的付出，也就没有如今的成果，也就没有对未来科 研充满信心的我。在此，请让我再次对你们说一声“谢谢”！ 方文迪 二零一五年四月末于蕙风湖畔 I 杭州师范大学硕士学位论文摘要 杭州师范大学硕士学位论文 摘要 摘 要 全氟辛酸（Perfluorooctanoic Acid, PFOA），在世界范围的水体中均已检测到， 其作为全氟化物（Perfluorinated Compounds, PFCs）的代表物之一，对水生生物 造成严重威胁，然而，极少有研究关注 PFOA 对水生生物免疫系统的影响。本研 究选用模式生物斑马鱼（Danio rerio）的免疫器官脾脏和肾脏为研究对象；采用 体内暴露方法，暴露浓度为 0.05，0.1，0.5 和 1 mg/L，暴露时间为 7，14 和 21 天；通过透射电镜观察细胞结构变化，定量即时聚合酶链锁反应（quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction, qRT-PCR）检测免疫球蛋白，relA 转录因子， 髓样分化因子(Myeloid Differentiation Factor 88, myd88)，Toll 样受体 2（Toll-Like Receptor 2, TLR2）以及相关细胞因子 mRNA 表达水平；此外，利用 MATLAB R2013a 软件对试验数据进行三阶多项式拟合，利用 Excel 2007 软件将免疫球蛋 白相对表达量进行雷达三角整合，并分析了各个指标之间相关性，从而深入研究 PFOA 致水生生物免疫毒效应的潜在致毒机理。 透射电镜结果显示：PFOA 会对脾脏和肾脏组织结构造成损伤；干扰脾脏免 疫细胞脂质运输及代谢，导致其出现脂褐质色素颗粒；诱导脾脏和肾脏免疫细胞 内线