结肠癌细胞与成纤维细胞相互作用调控CX43的表达-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

浙 江 浙 江 大 学 医 学 院 硕 士 学 位 论 文 结 肠 孩 佃 胞 与 成 纤 难 佃 胞 相 互 作 用调 拉 劣 脂 的 衣 达 即 盯 极 硕 士 研 究 生 武刹 导 师 邓 耘 副敬 掇 中文 摘 要 背 景 结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着人们的健康 ，在 西 方 经 济 发 达 国家 的居 民恶 性 肿 瘤 死 因顺 位 中 ，结 直 肠 癌 位 居 第 二 ，在 我 国居 民 的恶 性 肿 瘤 死 因顺 位 中 ，结 直 肠 癌 位 居 第 四位 左 右 。近 年 来 ，其 发 病 率 呈 上 升 趋 势 ，特 别 是 在 城 市 和 发 达 农 村 地 区 尤 其 明显 。积 极 而 深 入 的 开 展 结 直 肠 癌 发 病 机 制 的研 究 对 提 高大 肠 癌 的 诊 断 、 治 疗 水 平 及 预 后 估 计 具 有 十 分 重 要 的现 实 意 义 。 间质 细 胞 与 细 胞 外 基 质 成 分 构 成 的肿 瘤 微 环 境 对 肿 瘤 细 胞 的 生 长 、浸 润 和 转 移 具 有 重 要 作 用 。活 化 的成 纤 维 细 胞 ，又 称 为 肌 成 纤 维 细 胞 或 者 癌 相 关 成 纤 维 细 胞 ，是 肿 瘤 间质 中数 量 最 丰 富 的 细 胞 类 型 ，表 达 平 滑 肌 细 胞 的标 志 物 a 一平 滑 肌 肌 动 蛋 白 (a 一sm ooth m u sle actin ，a 一SMA ) 和 间 叶 细 胞 的 标 志 物 波 形 蛋 白 (v im en t in )。 目前 研 究 多 倾 向于 正 常 的成 纤 维 细 胞 能 够 抑 制 肿 瘤 生 长 ，而 癌 相 关 成 纤 维 细 胞 则 能 促 进 肿 瘤 增 殖 。 肿 瘤 细 胞 与 间 质 成 纤 维 细 胞 之 间 存 在 相 互 作 用 ，作 用 方 式 分 为 直 接 作 用 和 间 接 作 用 两 种 方 式 。直 接 相 互 作 用 主 要 通 过 细 胞 间 缝 隙 连 接 通 讯 进 行 ，间 接 相 互 作 用 则 主 要 通 过 分 泌 细 胞 因 子 进 行 。 缝 隙 连 接 细 胞 间 通 讯 (G aP 」un cti on al in tereellu lar eomm un ieation ，o JIe )， 即 缝 隙 连 接 (g即 jun etion) ，在 组 织 生 长 发 育 、维 持 组 织 器 官 内细 胞 间 的 协 调 稳 定 等 方 面 起 重 要 作 用 。缝 隙 连 接 是 细 胞 间 直 接 进 行 信 息 交 换 的 重 要 通 道 ，是 相 邻 细 胞 间 可 以 开 关 的 通 道 ，由位 于 相 邻 细 胞 膜 上 两 个 连 接 子 蛋 白(C 。nn exin ， C X )相 互 锚 定 而 成 的 。 目前 认 为 C X s 是 一 抑 癌 基 因 家 族 .， 其 中 C X 43 是 一 种 主 要 的 细 胞 间 隙 连 接 蛋 白 ， 它 也 表 现 出肿 瘤 抑 制 基 因 的 特 点 。 多 种 癌 细 胞 中 都 有 C X 43 表 达 下 降 。 当 肿 瘤 细 胞 与 周 围 正 常 细 胞 间 的 细 胞 缝 隙 连 接 蛋 白异 常 表 达 或 者 缺 失 时 ，肿 瘤 细 胞 便 脱 离 机 体 的 调 控 ，出现 无 浙 浙 江 大 学 医 学 院 硕 士 学 位 论 文 限增 殖 。因此 ，通 过 恢 复 细 胞 间 隙连 接 通 讯 ，抑 制 肿 瘤 生 长 和 转 化 ，将 为 肿 瘤 治 疗 开 辟 新 的途 径 。 我 们 研 究 发 现 ，在 大 肠 癌 组 织 切 片 中 ，浸 润 前 沿 处 C X4 3 的表 达 强 于 肿 瘤 实 体 内部 ; 在 模 拟 人 体 内环 境 的 S W 620一H SF 共 培 养 双 层 立 体 细 胞 球 模 型 中 ，两 种 原 本 不 表 达 C X4 3 的细 胞 在 交 界 处 出现 C X 43 的 表 达 。我 们 在 己有 实 验 基 础 上 ， 通 过 多 种 方 法 继 续 验 证 C X 43 在 共 培 养 体 系 中 的表 达 ，并 明确 C X 43 表 达 于 共 培 养 体 系 中 的 哪 一 种 细 胞 ，以及 在 肿 瘤 细 胞 和 间质 成 纤 维 细 胞 共 培 养 过 程 中 ，肿 瘤 细 胞 和 间质 细 胞 发 生 怎 样 的相 互 作 用 。 目的 本实验在结肠癌细胞一成纤维细胞相互作用能够诱导 c x 43 表达的基础 上 ，明确 相 互