姜黄素对压迫性脊髓损伤脱髓鞘病变的保护作用-人体解剖与组织胚胎学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 BBB 英文全称 Basso, Beattie and Bresnahan 中文全称 运动功能评分 CSCI compression spinal cord injury 压迫性脊髓损伤 DAB d dd H2O ESs h LFB MDSCs MBP min MSCs NSCc OPCs PFA PBS SCI SDS s TEM Tris 3,3-diaminobenzidine-tetrahydro-chloride day Double distilled H2O Embryonic stem cells hour Luxol fast blue Muscle-derived stem cells Myelin basic protein minute Mesenchymal stem cells Neural stem cells Oligodendrocyte precursor cells Paraformaldehyde Phosphate buffer saline Spinal cord injury Sodium dodecyl sulfate Second Transmission electron microscope Tris hytroxymethyl aminomethane 二氨基联苯胺 天 双蒸水 胚胎干细胞 小时 快蓝染色 肌源性干细胞 髓鞘碱性蛋白 分钟 间充质干细胞 神经干细胞 少突胶质前体细胞 多聚甲醛 磷酸盐缓冲液 脊髓损伤 十二烷基硫酸钠 秒 透射电镜 三羟甲基氨基甲烷 1 姜黄素对脊髓压迫性损伤脱髓鞘病变的保护作用及其 机制的研究 摘 要 研究发现，压迫性脊髓损伤(Compression spinal cord injury，CSCI)后， 髓鞘的丢失是由少突胶质细胞的凋亡引起的，其凋亡的病理机制与内 质网应激以及 Id2 的表达上调有关。但是，至今为止，对 CSCI 诱导的 脱髓鞘病变仍然没有行之有效的治疗方法。最近研究发现，姜黄素可 以抑制外伤引起的脊髓损伤，所导致的神经元凋亡。姜黄素是从姜黄 中提取的黄色酚醛树脂。然而，CSCI 后，姜黄素是否能通过抑制少突 胶质细胞凋亡，从而达到保护脱髓鞘病变的作用，至今尚未见相关报 道。 目的:探讨姜黄素对脊髓压迫性损伤脱髓鞘病变的保护作用及其 机制。 方法:采用自行设计的压迫装置，建立压迫性脊髓损伤模型。用 64 只健康的成年 SD 大鼠，雌雄不拘，随机分为假手术组（24 只），模型 组（20 只）和治疗组（20 只）。假手术组仅显露脊髓，不施压；模型 组和治疗组均做脊髓压迫术。治疗组，于脊髓压迫 2 h 后，减压，并腹 腔注射姜黄素（100 mg/kg）进行干预性治疗，而给予假手术组、模型 组 腹 腔 注 射 0.1M PBS ， 以 便 进 行 对 照 。 运 用 BBB （Basso Beattie Bresnahan）评分观察动物神经功能的恢复情况；应用 2 Luxol fast blue ( LFB )、锇酸染色和透射电镜等方法，对姜黄素处理前、 后脊髓白质纤维髓鞘的变化情况进行观察。运用免疫荧光双标检测用 药后白质中少突胶质细胞凋亡情况。通过免疫印迹法检测用药后 MBP、 Caspase-12、Actived caspase-3 以及 Cytochrome c 的表达变化。 结果:CSCI 60 min 后应用姜黄素，BBB 评分检测到，与模型组相 比较，动物行为学指标有所改善，BBB 评分升高，其差异具有统计学 意义(P0.05)。模型组大鼠白质有髓神经纤维出现水肿、排列疏松及髓 鞘缺失等退行性变，其纤维数目逐渐减少，与假手术组相比有统计学 意义(P0.05)；应用姜黄素后其白质髓鞘化神经纤维水肿、排列疏松等 病理变化有所减轻，其髓鞘化纤维计数较模型组增多，与模型组相比 具有统计学意义(P0.05)。免疫荧光双标结果显示：CSCI 后，对照组 Actived caspase-3+-CNPase 细胞广泛分布在白质中，而应用姜黄素后， 治疗组 Actived caspase-3+-CNPase 细胞明显减少。Western blot 结果显 示：治疗组与对照组相比，MBP 表达明显增加， Caspase-12、Actived caspase-3 以及 Cytochrome c 的表达均明显减少，差异具有统计学意义 (P0.05)。 结论：CSCI 后，姜黄素对脊髓压迫性损伤神经功能具有保护作用； 姜黄素可抑制少突胶质细胞的凋亡，其凋亡的信号途径与内质网应激 及其相关的 Cytochrome c 的释放有关。 关键词：脊髓压迫性